一、Toll样受体4与心血管疾病（论文文献综述）
魏潇琪[1]（2021）在《晚期糖基化终末产物与MD2-TLR4结合介导心脏衰老的机制研究》文中研究说明目的:探讨在衰老的过程中,晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）是否能够通过髓样分化蛋白2（myeloid differentiation 2,MD2）-toll样受体4（toll-like receptor 4,TLR4）途径介导慢性炎症,导致心肌重构、慢性心力衰竭。方法:动物水平研究,12只SD大鼠分成对照组,n=6（月龄3个月）与老年组,n=6（月龄24个月）。对比2组心肌HE形态学差异、Masson染色计算心肌胶原容积。对比二者心超结果,评价心功能。通过ELISA法对比二者AGEs-MD2、白介素6（interleukin-6,IL-6）、氨基末端脑钠肽前体（N terminal pro B type natriuretic peptide,NT-pro BNP）表达差异。心肌组织行Western blot及RT-PCR,判断对照组与老年组心肌MD2、TLR4及其下游炎症因子表达情况。细胞水平研究,H9C2细胞分为4组,正常对照组、AGEs组、正常+MD2抑制剂组、AGEs+MD2抑制剂组。通过ELISA法对比四组AGEs-MD2表达差异,行Western blot及RT-PCR,判断四组TLR4的胞内衔接蛋白髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,My D88）及炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达情况。临床水平研究,48名入组患者,分为对照组,年龄<65岁（n=21）,老年组年龄≥65岁（n=27）,对比两组AGEs-MD2水平差异,评估AGEs-MD2水平与年龄、IL-6、NT-Pro BNP、E/A比值的相关性。结果:动物水平研究,老年组血浆AGEs-MD2复合物在OD450处吸光度较对照组增高（P<0.01）。血浆中IL-6、NT-pro BNP表达含量较对照组增高（P<0.01）。心超结果示老年组左心室舒张末期内径、左心室收缩末期内径较对照组升高,E/A值下降。与对照组相比,老年组心肌细胞肥大、排列紊乱、过度纤维化。老年组心肌组织中My D88、IL-6m RNA表达水平较对照组增高（P<0.05）,核因子κB抑制蛋白α（Inhibitor of nuclear factor kappa-B alpha,Ik Bα）m RNA较对照组下降。老年组心肌组织AGEs、TLR4、MD2蛋白表达量较对照组相对较高（P<0.01）。细胞水平研究,AGEs组细胞AGEs-MD2复合物在OD450处吸光度较其它组增高（P<0.05）;AGEs组My D88蛋白表达水平较其它组增高（P<0.05）;AGEs组IL-6、TNF-αm RNA相对表达水平较其它组明显增高（P<0.05）。人群研究中,校正血肌酐后,老年组血浆AGEs-MD2相对吸光度仍明显高于对照组,且血浆AGEs-MD2水平与年龄、NT-Pro BNP、IL-6正相关,与E/A水平负相关（P<0.05）。结论:随着衰老过程在体内集聚的AGEs可以通过MD2-TLR4-My D88经典炎性通路介导的慢性炎症,引起心肌纤维化、心脏重构和心功能下降,MD2抑制剂可在一定程度上抑制这种效应;人体内血浆AGEs-MD2水平随年龄升高,且与心脏舒张功能相关。
林含[2]（2021）在《肺炎支原体与川崎病相关性分析及发病机制研究》文中指出目的:川崎病（Kawasaki disease,KD）,即皮肤黏膜淋巴结综合征是一种小儿急性发热出疹性血管炎性疾病,好发于5岁以下儿童,其病理特征为全身中小血管炎,主要累及冠状动脉,导致冠状动脉扩张或冠状动脉瘤等冠状动脉病变,是儿童发生后天性心脏病的危险因素之一。目前KD流行病学调查认为感染因素是KD的病因之一,发现肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）感染可能与KD相关。故本研究旨在验证MP与KD之间的相关性,并探讨可能的发病机制。方法:1.MP感染与KD相关性分析:纳入2015年1月至2018年12月中国福建省妇幼保健院诊断KD的儿童,分为MP感染KD组和非MP感染KD组,提取病历一般资料、临床表现、实验室指标、超声心动图结果,使用IBM SPSS对数据进行描述性分析,计量资料采用t检验或秩和检验、计数资料采用χ2检验进行单因素分析,对有统计学意义的资料进行Logistic回归分析。2.体外实验探讨MP致KD发病机制:（1）炎症指标检测:以不同浓度Mp-LAMPs处理HCAEC,用Western Blot、RT-PCR及ELISA检测各组细胞中细胞间黏附分子-1（Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）、血管细胞粘附分子-1（Vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-ɑ）、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）、诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxide synthase,i NOS）的表达水平;（2）细胞线粒体功能及自噬检测:以不同浓度Mp-LAMPs、羰基氰化物间氯苯腙（Carbonyl cyanide m-chlorophenyl hydrazone,CCCP）、环孢素A（Cyclosporin A,Cs A）、Mp-LAMPs+CCCP及Mp-LAMPs+Cs A处理HCAEC,通过荧光显微镜观察各组细胞的线粒体结构、线粒体膜电位及活性氧（Reactive oxygen species,ROS）含量变化,并检测三磷腺苷（Adenosine triphosphate,ATP）含量变化及线粒体自噬相关信号磷酸酶和紧张素同源物诱导激酶1（Phosphatase and tensin homologue-induced putative kinase 1,PINK1）、Parkin、P62、LC3的表达水平。结果:1.本研究共纳入330名KD患儿,其中MP感染KD患儿159名、非MP感染KD患儿171名。两组患儿的年龄（1.57岁VS 1.42岁,P=0.000）、发热天数>10天的患儿比例（27.0%VS 16.4%,P=0.034）、血钠（134.38mmol/L VS135.71mmol/L,P=0.019）、前白蛋白（11.43mg/d L VS 12.73mg/d L,P=0.025）、白蛋白（35.90g/L VS 36.91g/L,P=0.042）及小冠状动脉瘤发生率（57.8%VS69.0%,P=0.035）有显着差异;Logistic回归分析结果显示MP感染（OR:0.515;95%CI:0.309-0.860;P=0.011）、血钠（OR:0.910;95%CI:0.851-0.972;P=0.005）和前白蛋白（OR:0.900;95%CI:0.854-0.949;P≤0.001）是KD小冠状动脉瘤的相关因素。2.在HCAEC中,与空白对照组（未予特殊处理）相比发现Mp-LAMPs处理组ICAM-1、VCAM-1、i NOS、TNF-ɑ、IL-6及LDH的表达增加,并呈浓度依赖性。3.在HCAEC中,与空白对照组（未予特殊处理）相比发现Mp-LAMPs处理组细胞线粒体膜电位降低、ATP含量减少、ROS累积及线粒体自噬增强,且加入CCCP起促进作用,而加入Cs A起抑制作用。4.在HCAEC中,与空白对照组（未予特殊处理）相比发现Mp-LAMPs处理组PINK1、Parkin和LC3表达上调,而P62表达下调。结论:1.MP感染与KD存在一定相关性,合并MP感染的KD患儿年龄更大、发热时间更长,血钠、白蛋白及前白蛋白水平更低,MP感染、血钠和前白蛋白水平是KD小冠状动脉瘤的相关因素。2.在HCAEC中,Mp-LAMPs可诱导PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬,上调LC3表达,下调P62表达,协同氧化应激,促进炎症反应,促进炎症介质TNF-ɑ、IL-6、ICAM-1、VCAM-1及LDH的释放,导致HCAEC炎性浸润,引起冠状动脉病变。
金圣博[3]（2020）在《基于Toll样受体信号介导炎症反应探讨温针灸对自发性高血压大鼠的抗炎机制》文中认为目的:本实验以自发性高血压大鼠为动物模型,在“从脾论治”高血压病的理论指导下,探寻温针灸足三里穴对自发性高血压大鼠降压机制,同时通过Toll受体信号通路（TLR4/My D88/NF-κB）介导下游炎症反应,从而探讨温针灸对自发性高血压大鼠抗炎机制及内皮细胞保护作用机制,为高血压病中医药临床防治提供可靠的基础理论依据。材料与方法:将10只雄性京都种大鼠（WKY）纳入空白组,依照随机数字表格法将40只雄性自发性高血压大鼠（SHR）随机分至模型组、温针灸组、针刺组、艾灸组,每组10只。常规饲料适应性喂养一周,采用智能无创血压计测量各组大鼠尾动脉血压,测量3次取平均值。开始实验,予正常组和模型组大鼠单纯固定20min,日一次,不予针灸干预;予温针灸组大鼠温针灸双侧足三里穴20min;予针刺组大鼠针刺双侧足三里穴20min;予艾灸组大鼠艾灸双侧足三里穴20min,日一次,连续治疗15天,同时测量实验开始后的第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21天上午9点～11点的各组大鼠血压,连续测量3次取平均值,录入Excel并待统计。治疗结束,予各组大鼠水合氯醛（10%）腹腔麻醉,固定、脱毛、消毒,沿腹中线开腹,暴露腹主动脉并迅速采血,将血液离心后取上清液放入无菌EP管中冻存备用,采用ELISA法检测血清炎症因子IL-6、IFN-β、TNF-α含量;血清免疫指标Ig A、Ig M、Ig G含量;血管收缩因子Ang-Ⅱ、ET-1、VEGF含量。取一段完整的腹主动脉1cm,漂洗后用4%多聚甲醛溶液固定,HE染色法进行修块、包埋、制片,荧光显微镜下观察腹主动脉壁病理形态学变化。探查腹部,迅速取脾脏组织50mg放入EP管中冻存备用,HE染色法将固定好的大鼠脾脏组织修块、包埋、制片,荧光显微镜下观察脾脏组织病理学改变及炎性细胞浸润状态;采用Western Blot法,取脾脏组织50mg,研磨、离心,吸取上清液,提取脾脏组织蛋白质,使用BCA检测法测定蛋白质浓度,通过Image J软件计算灰带条图片灰度值,定量分析出各组TLR4、My D88、NF-κB p65蛋白表达量及NF-κB p65蛋白磷酸化水平;取脾脏组织100mg,提取大鼠脾脏组织m RNA,采用q PCR法,通过逆转录反应、PCR扩增反应,导出q PCR数据并计算分析出TLR4、My D88、NF-κB p65 m RNA的表达水平。实验相关数据使用SPSS 22.0软件进行统计学分析。实验结果以均数±标准差（x±s）表示;组间数据差异比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）,以P<0.05表示具有统计学差异。结果:1.各组大鼠治疗前后血压变化:实验第2天温针灸组、针刺组血压开始逐渐下降,实验第7天血压开始显着下降,温针灸组下降幅度大于针刺组;实验第15天实验干预结束,血压降幅明显程度依次为温针灸组、针刺组、艾灸组;实验干预结束后继续测量血压至第21天发现,温针灸组与艾灸组血压较为平稳,无明显浮动,而针刺组、模型组、正常组血压均有不同程度上浮,其中针刺组血压上升幅度较为明显。2.各组大鼠脾脏动脉周围淋巴鞘及淋巴细胞分布情况:正常组与温针灸组白髓面积相对较大,动脉周围淋巴鞘组织较厚,可清晰观察到鞘内侧淋巴小结,鞘外侧分布大量且密集的淋巴细胞;而模型组、针刺组和艾灸组白髓和脾小结所占面积均有不同程度缩小,动脉周围淋巴鞘显着缩小,鞘周围淋巴细胞分布也较为稀少,其中以模型组缩小程度最为明显。3.各组大鼠血清炎症因子IL-6、IFN-β、TNF-α含量分析:与正常组比较,模型组、针刺组、艾灸组IL-6、TNF-α含量显着升高,IFN-β含量显着降低;温针灸组TNF-α含量显着升高,IFN-β含量显着降低。与模型组比较,温针灸组IL-6、TNF-α含量显着降低、IFN-β含量显着升高;针刺组TNF-α含量显着降低,艾灸组IFN-β含量显着升高。与温针灸组比较,针刺组与艾灸组IL-6、TNF-α含量显着升高,IFN-β含量显着降低。与针刺组比较,艾灸组TNF-α含量显着升高。以上差异皆具有统计学意义（P<0.05）。4.血压异常与免疫炎症状态之间存在密切关联且相互影响:大鼠收缩压、舒张压与IL-6、TNF-α含量之间呈正相关,与IFN-β含量之间呈负相关,说明随着大鼠血压值的升高,血清内IL-6、TNF-α含量也随之增加,加快血清炎症因子的表达,而IFN-β含量随之降低。5.Toll样受体信号通路（TLR4/My D88/NF-κB）中的各信号分子蛋白表达及NF-κB p65磷酸化水平:与正常组比较,模型组、针刺组TLR4、My D88、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65蛋白磷酸化水平显着升高,温针灸组只有TLR4蛋白表达和NF-κB p65蛋白磷酸化水平显着升高,而艾灸组TLR4、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65蛋白磷酸化水平显着升高;与模型组相比,温针灸组TLR4、My D88、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65蛋白磷酸化水平显着降低;与温针灸组比较,针刺组TLR4、My D88、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65蛋白磷酸化水平显着升高,而艾灸组TLR4、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65蛋白磷酸化水平显着升高。以上差异皆具有统计学意义（P<0.05）。6.Toll样受体信号通路（TLR4/My D88/NF-κB）中的各信号分子基因表达情况:与正常组比较,模型组、针刺组、艾灸组大鼠脾脏组织TLR4、My D88、NF-κB p65 m RNA表达水平显着升高,温针灸组TLR4、My D88表达水平显着升高;与模型组比较,温针灸组大鼠脾脏组织TLR4、My D88、NF-κB p65 m RNA表达水平显着降低,针刺组TLR4表达水平有所降低,而艾灸组TLR4、My D88 m RNA表达水平下降;与温针灸组比较,针刺组和艾灸组大鼠脾脏组织TLR4、My D88、NF-κB p65 m RNA表达水平显着升高。以上差异皆具有统计学意义（P<0.05）。7.各组腹主动脉壁HE染色结果分析:正常组主动脉壁内膜光滑完整,各层细胞排列有序,内皮细胞未见脱落、增生,中膜平滑肌细胞及弹性纤维紧密排列有序;模型组腹主动脉壁内膜明显增生、增厚、凸起,内皮细胞存在脱落情况,中膜平滑肌层排列混乱,有增生、肥大,部分区域出现变形、萎缩,弹性纤维间隔参差不齐,偶有断裂、皱褶现象,外膜细胞欠平整,偶有脱落情况;温针灸组腹主动脉壁内膜略粗糙,少许内皮细胞脱落,中膜平滑肌细胞排列偶有弯曲、褶皱,弹性纤维间隙大致均匀,部分出现缩小现象;针刺组大鼠腹主动脉壁内膜粗糙、欠平整,内皮细胞存在脱落现象,中膜平滑肌细胞增生、肥大、排列紊乱,弹性纤维出现褶皱、变形,间隙欠均匀,部分外膜出现突起、变形及细胞脱落现象;艾灸组大鼠腹主动脉壁内膜褶皱、变形,内皮细胞有脱落现象,中膜平滑肌细胞部分萎缩、减少,排列欠整齐,弹性纤维间隙不均匀,外膜欠光滑,偶有增生现象。8.各组血清免疫学指标比较:与正常组比较,模型组和艾灸组血清Ig A、Ig G含量显着降低,血清Ig M含量显着升高,而针刺组血清Ig A含量显着降低;与模型组比较,温针灸组血清Ig A、Ig G含量显着升高,艾灸组血清Ig G含量显着降低;与温针灸组比较,针刺组血清Ig A含量显着降低,艾灸组血清Ig A、Ig G含量显着降低;与针刺组比较,艾灸组血清Ig G含量显着降低。以上差异皆具有统计学意义（P<0.05）。9.各组血清AngⅡ、ET-1、VEGF含量比较:与正常组比较,模型组、艾灸组血清AngⅡ、ET-1、VEGF含量显着升高,温针灸组血清ET-1含量显着升高,针刺组血清AngⅡ、ET-1含量显着升高;与模型组比较,温针灸组AngⅡ、ET-1、VEGF含量显着降低,针刺组ET-1、VEGF含量显着降低,艾灸组ET-1含量显着降低;与温针灸组比较,针刺组ET-1含量显着增高,艾灸组AngⅡ、ET-1、VEGF含量显着增高,以上差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:1温针灸足三里可显着降低自发性高血压大鼠血压,疗效平稳、持久。2血压异常与免疫炎症状态之间存在密切关联且相互影响;温针灸足三里穴可显着改善自发性高血压大鼠体内存在的炎症状态。3温针灸足三里穴可通过抑制大鼠脾组织Toll样受体信号通路中TLR4、My D88、NF-κB p65蛋白及m RNA表达调控信号传导。4温针灸足三里穴可通过调控TLR4/My D88/NF-κB信号通路,减轻血清炎症状态,提高血清抗炎能力,良性调控血管舒缩功能,从而降低炎性损伤程度,发挥对内皮细胞的保护作用。
郁晨[4]（2020）在《基于“肝—肠”轴探讨冠心宁片抗西藏小型猪AS的作用及机制》文中进行了进一步梳理目的观察冠心宁片（GXN）对高脂诱导西藏小型猪AS模型的作用,并从“肝-肠”轴角度探讨其可能的作用机制,为GXN的药理机制研究奠定基础。方法（1）取3-4月龄雄性西藏小型猪18只,经适应性饲养后,按血脂、血糖和体重分成3组,即正常对照（NC）组、AS模型组和GXN干预组,每组6只。NC组始终饲喂基础饲料。AS组和GXN组饲喂高脂/高胆固醇（HFC）饲料,连续36周,GXN组于HFC饮食24周后每日给予GXN 162mg/kg,连续干预12周。给药周期结束后取血并进行糖耐量实验,随后行安乐死术处理动物。检测糖脂代谢生化指标和炎症指标,计算AI和HOMA-IR指数;用HE和苏丹Ⅳ染色观察主动脉病理和脂质沉积变化,并进行主动脉转录组高通量测序分析。（2）检测肝组织中TC、TG、SOD和MDA含量,并通过HE染色观察肝脏和小肠组织病理改变,通过油红“O”染色评估肝脏脂质沉积变化;并进行肝脏和小肠转录组高通量测序分析,同时对结肠内容物进行16S rDNA高通量测序分析。结果（1）与NC组相比,AS组西藏小型猪血浆TC、HDL-C、LDL-C、FFA、FMN、FINS、IL-6、IL-1β、TNF-α、CRP 水平以及 AI 和 HOMA-IR 指数均显着升高（P<0.05,P<0.01）;糖耐量异常、主动脉脂质沉积增多、血管内可见明显的AS斑块和炎症细胞浸润且IMT增加（P<0.01）。与AS组比,GXN组显着降低上述糖脂代谢和炎症指标以及AI和HOMA-IR指数（P<0.05,P<0.01）,改善糖耐量异常、抑制主动脉脂质沉积和AS斑块,降低血管IMT（P<0.01）。主动脉转录组分析:NC组和AS组相比,获得2475个差异基因（1792个上调和685个下调）;AS组和GXN组相比,获得731个差异基因（401个上调和330个下调）。Venn分析发现了 476个呈相反调控的共有差异基因。GSEA分析显示,这两个数据集分别富集到109个和103个信号途径,并得到67个共有且呈相反调控的途径,还发现GXN显着影响人类不稳定AS斑块基因集。另外,对476个差异基因进行生物学功能和途径分析显示,免疫反应、炎症反应、对脂多糖（LPS）的反应、细胞对肿瘤坏死因子的反应、对胰岛素的反应、细胞粘附等35个GO生物学过程被显着富集;同时钙信号通路、血管平滑肌收缩、类固醇生物合成、TNF信号通路、NF-κB信号通路、细胞粘附分子、胰岛素分泌等46个KEGG途径被显着富集。此外,通过对主动脉差异基因PPI网络的构建,发现 6 个 Hub 基因（MMP9、IL6、CXCL10、ISG15、VCAM1、LEP）和 1 个以IRF1为转录调控因子的核心模块,该模块与TNF信号途径、流体剪切应力与动脉粥样硬化、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路等有关。（2）与NC组相比,AS组肝脏TC、TG和MDA含量显着升高（P<0.05,P<0.01）,并可见肝脏脂肪变性、大量炎症细胞浸润和脂质沉积增多。与AS组比,GXN组肝脏TC和MDA含量显着降低（P<0.05,P<0.01）,且肝内脂质沉积和炎症反应有所减轻。肝脏转录组分析:NC组和AS组相比,获得731个差异基因（472个上调和259个下调）;AS组和GXN组相比,获得216个差异基因（106个上调和110个下调）,Venn分析发现了 71个呈相反调控变化的共有差异基因。GSEA分析显示,这两个数据集分别富集到72个和60个信号途径,并得到46个共有且呈相反调控的途径。另外,对71个差异基因进行生物学功能和途径分析,发现炎症反应、免疫反应、单核细胞趋化性、对LPS的反应等5个GO生物学过程被显着富集;同时Toll样受体信号通路、病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用、细胞凋亡、B细胞受体信号通路等5个KEGG途径被显着富集。此外,通过对肝脏差异基因PPI网络构建,发现2个Hub基因（CXCL10和CCL4）和1个核心模块,该模块与趋化因子信号通路、细胞因子和细胞因子受体的相互作用、Toll样受体信号通路等有关。（3）小肠HE染色结果显示,相比NC组,AS组可见小肠绒毛水肿,部分毛细血管充血,上皮细胞排列紊乱,甚至出现坏死,肠道固有层中大量单核细胞和嗜酸性粒细胞浸润;而GXN组能明显改善上述病变。小肠转录组分析:NC组和AS组相比,获得377个差异基因（156个上调和221个下调）,AS组和GXN组相比,获得1207个差异基因（645个上调和562个下调）,并识别了 205个共有且呈相反调控的差异基因。GSEA分析显示,这两个数据集分别富集到41个和70个信号途径,并得到26个共有且呈相反调控的途径。另外,对205个差异基因进行生物学功能和途径分析,发现了炎症反应、B细胞受体信号通路、髓样树突细胞趋化过程、对LPS的反应等9个GO生物学过程被显着富集;同时富集到18个显着的KEGG途径,主要涉及PPAR信号通路、细胞因子和细胞因子受体的相互作用、胰高血糖素信号通路、B细胞受体信号通路、脂肪的消化吸收、胰岛素分泌、胆固醇代谢等。此外,通过对小肠差异基因PPI网络构建,发现了 4个Hub基因（CXCR5、CD19、CD79B和CNR2）和1个最核心的模块,该模块与趋化因子信号通路、细胞因子和细胞因子受体的相互作用、神经活性配体-受体相互作用、鞘脂信号通路等有关。（4）肠道菌群分析显示:三组小型猪肠道内容物中共有1853个OTUs。与NC组相比,AS组小型猪肠道菌群多样性降低（P<0.05）;从门水平来看,AS组Bacteroidete、Euryachaeota和Spirochaetes丰度显着降低（P<0.05）,Proteobacteria、Verrucomicrobia、Synergistetes丰度显着升高（P<0.05）,同时Bacteroidetes/Firmicutes比值显着降低（P<0.01）;与 AS组比,GXN 组Firmicutes丰度显着升高（P<0.05）,而Proteobacteria丰度显着降低（P<0.05）。从属水平来看,与NC组比,Escherichia和Gemmiger丰度在AS组中显着上调（P<0.05）,而在GXN组中显着下调（P<0.05）;相反,与NC组比,Paraprevotella丰度则在AS组中显着下调（P<0.05）,而在GXN组中显着上调（P<0.05）。进一步 LEfSe 分析,发现 Escherichia、Gemmiger 和 Paraprevotella可能是 GXN 的作用靶点菌属。结论冠心宁片能调节西藏小型猪AS模型糖脂代谢、改善其胰岛素抵抗和慢性低度炎症、抑制主动脉脂质沉积和AS斑块,表明GXN具有抗AS作用;其机制可能与影响TNF信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、胆固醇代谢和胰岛素分泌等途径有关,且MMP9、IL-6、CXCL10、ISG15、VCAM-1和LEP基因可能是GXN作用于主动脉的关键基因,而IRF1可能是GXN发挥抗AS作用的关键转录因子。冠心宁片一方面通过调节肠道Paraprevotella和Gemmiger菌属,影响肠道PPAR信号通路和胰岛素分泌途径,抑制小肠对胆固醇和葡萄糖的吸收,减轻肝内脂质合成和胰岛素抵抗,延缓AS的发生;另一方面通过改善肠道Escherichia菌属,抑制LPS的产生,并通过调节多种信号途径维持肠道屏障功能,减少LPS等微生物分子模式进入循环系统,抑制肝脏和主动脉中Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、TNF信号通路等促炎通路的激活,减少炎性因子释放,改善机体慢性低度炎症反应,从而发挥抗AS作用。表明,冠心宁片抗西藏小型猪AS的作用与“肝-肠”轴途径密切相关。
靳妮[5]（2020）在《Toll样受体4水平与慢性心力衰竭的相关性分析》文中研究指明目的:探讨外周血Toll样受体4（TLR4）水平与慢性心力衰竭（CHF）严重程度的关系。方法:选取我科2019年1月-2019年6月收住的CHF患者（病例组）65例和同期非心衰患者30例（对照组）,根据NYHA心功能分级将CHF患者分为心功能Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级组。应特别注意按排除标准排除不符合研究的患者,详细记录所有合格研究对象的一般资料及疾病史,行心脏多普勒彩超测定左室射血分数（LVEF）及左室舒张末内径（LVEDD）,抽血化验血浆TLR4（采用ELISA法测定其表达）、BNP及生化指标。结果:1.一般临床资料比较中两组患者差异无统计学意义（P>0.05）,具有可比性;2.HF可由多种心血管系统疾病造成,但病因不同并不影响发生HF时的TLR4水平（P>0.05）;3.CHF组与对照组相比,前者外周血TLR4水平更高（t=-4.692,P<0.05）,不同NYHA分级的CHF患者的TLR4水平具有显着差异（P<0.05）,且随心功能级别的上升,表达水平也更高;4.Pearson直线相关分析结果提示TLR4浓度与NYHA分级和LVEDD呈正相关﹙r=0.700,r=0.318,P<0.05﹚,而与LVEF呈负相关（r=-0.578,P<0.05）。5.ROC曲线分析显示BNP和TLR4的曲线下面积为0.926和0.736,证明通过测定外周血TLR4水平诊断心衰有具有可行性。结论:TLR4水平与CHF患者的心功能密切相关,TLR4水平越高,心衰程度越严重,因TLR4表达水平与心力衰竭之间的正相关关系,临床上也许可以通过检测TLR4水平对心衰的程度做出判断,对心衰患者的预后做出预测,而通过抑制TLR4水平或许可以达到治疗心衰的目的。
陈冲[6]（2020）在《细粒棘球蚴囊液体外保护脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9C2损伤的效果评价及机制研究》文中进行了进一步梳理背景和目的:心肌炎是指由感染或非感染性因素引起的心脏病理免疫过程的临床和组织学表现,通常会继发其他心血管疾病,如急性心力衰竭和慢性扩张型心肌病等。心肌炎的临床表现复杂多样,且病程的轻重缓急悬殊,临床上对心肌炎的治疗方法有一定局限性,如非甾体类抗炎药在小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎中被证明有毒害作用,现有的诊治方法只能降低住院率,但是病死率并没有明显下降。因此对新型抗心肌炎药物的研究应运而生。细粒棘球蚴囊液作为包虫感染宿主后在宿主内形成的包囊的主要成分,可以调节宿主免疫应答,使包虫长期寄生在宿主体内但无明显症状。细粒棘球蚴囊液可以通过调节宿主免疫系统抑制宿主炎症反应。本实验研究细粒棘球蚴囊液对LPS引起的大鼠心肌细胞H9C2炎性损伤的保护作用,并探讨其发生的可能机制,为心肌炎的治疗提供新的方法和思路。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,使用LPS（终浓度为10μg/ml）建立心肌炎损伤模型,不同浓度细粒棘球蚴囊液（200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml）作用于该模型后,用相差显微镜观察各组H9C2细胞形态;使用MTT实验检测各组H9C2细胞生存率。200μg/ml细粒棘球蚴囊液作用于LPS诱导的细胞炎性损伤模型后,流式细胞仪检测H9C2细胞凋亡水平和活性氧水平,Real Time PCR方法检测H9C2细胞TLR4/NF-κB信号通路相关分子tlr4、p38、NF-κB和Il6的mRNA水平,Western Blot方法检测H9C2细胞TLR4/NF-κB信号通路相关TLR4、磷酸化p38和NF-κB蛋白的表达水平,阐明细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞炎性损伤的保护效果及可能机制。结果:1.MTT法检测细胞生存率,结果显示,与FBS组相比,各浓度细粒棘球蚴囊液组的细胞生存率没有降低,表示细粒棘球蚴囊液在体外对H9C2细胞没有毒性作用,与LPS组相比,CF 200μg/ml+LPS组（p=0.012）和CF100μg/ml+LPS组（p=0.006）细胞生存率均升高,且细胞形态接近正常H9C2细胞长梭形形态,提示细粒棘球蚴囊液对脂多糖诱导的H9C2细胞损伤有保护作用。2.Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测CF 200μg/ml+LPS组细胞凋亡水平,结果显示,与LPS组（74.25%±20.45%）相比,CF 200μg/ml+LPS组细胞凋亡比例（64.00%±15.07%）有明显降低趋势,但没有统计学差异。3.DCFH-DA法检测CF 200μg/ml+LPS组ROS水平,结果显示,与LPS组（11211.33±1028.65）相比,CF 200μg/ml+LPS组的活性氧水平（2023.67±636.48）明显降低（p<0.001）。4.Real Time PCR检测各组H9C2细胞TLR4/NF-κB信号通路相关分子tlr4、p38、NF-κB和Il6的mRNA水平,结果显示:与LPS组tlr4（2.41±1.26）、NF-κB（7.97±5.83）相比,CF 200μg/ml+LPS组tlr4（0.94±1.08）、NF-κB（4.11±2.28）mRNA水平呈降低趋势,但没有统计学差异,p38和Il6的mRNA水平无明显变化。Western Blot检测各组H9C2细胞TLR4/NF-κB信号通路相关TLR4、磷酸化p38、NF-κB蛋白的表达水平,结果显示:与LPS组TLR4（0.82±0.63）、NF-κB（1.09±0.20）相比,CF 200μg/ml+LPS组的TLR4（0.68±0.19）、NF-κB（0.96±0.56）蛋白的表达水平降低但没有统计学差异;与LPS组（0.79±0.15）相比,CF200μg/ml+LPS组（1.00±0.09）的磷酸化p38蛋白水平升高但没有统计学差异。结论:1.细粒棘球蚴囊液对H9C2细胞的生长没有毒性,且可保证细胞正常生长;细粒棘球蚴囊液对LPS引起的H9C2细胞炎性损伤具有保护效应,并可促进H9C2细胞生长。2.细粒棘球蚴囊液通过抑制细胞凋亡和ROS水平对LPS诱导H9C2细胞炎性损伤产生保护效应,而不抑制TLR4/NF-κB信号通路上相关分子的表达。
黄丽华[7]（2020）在《间歇缺氧对心肌的损害及TLR-4在心肌中的表达》文中提出目的慢性间歇性缺氧是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS）的主要病理生理特征,亦是OSAHS导致人体多系统长期慢性炎症性反应的重要原因。Toll样受体-4（Toll-like receptor-4,TLR-4）是参与非特异性免疫的一类重要蛋白质分子,在人体炎症反应中起重要作用。本实验通过建立大鼠间歇缺氧模型模拟OSAHS的发生过程,研究间歇缺氧对心肌损伤的作用,并探讨TLR-4在间歇缺氧大鼠心肌组织中的表达及其临床意义,从而为临床上预防及治疗OSAHS相关心血管疾病提供新的诊疗依据和研究思路。方法将32只健康雄性Wistar大鼠随机平均分成4组,分别为1.正常对照组:即常氧环境,大鼠可自由活动;2.轻度缺氧组:放置于间歇性低氧舱中,造成氧浓度为15%的间歇性低氧模型;3.中度缺氧组:放置于间歇性低氧舱中,造氧浓度为9%的间歇性低氧模型;4.重度缺氧组:放置于间歇性低氧舱中,造成氧浓度为6%的间歇性低氧模型。每日造模时间为8小时,连续造模5周后处死大鼠,取大鼠心脏组织,苏木精-伊红染色后在电子显微镜下观察心脏组织形态学改变,利用免疫组化法观察TLR-4在不同程度间歇缺氧大鼠心脏组织中的表达。结果1.大鼠心脏组织HE染色后在电子显微镜下可见相较于空白组大鼠心肌组织,轻度缺氧组大鼠出现了部分心肌组织走行紊乱,但细胞核大小及排列仍较为规则。中度缺氧组大鼠心肌组织呈“波浪形”排列,细胞核大小不一,排列较为紊乱,心肌间隙明显增大。重度缺氧组大鼠心肌排列较中度缺氧组更不规则,心肌间隙增大,部分心肌断裂,部分心肌细胞变性、坏死。2.大鼠心脏组织免疫组化染色后于光镜下观察可见,TLR-4在正常心脏组织巨噬细胞膜及细胞质上有少量表达。在间歇缺氧组大鼠的心脏组织中除巨噬细胞外,可见TLR-4阳性信号于心肌细胞细胞质中及细胞膜表面均有表达,颜色多呈棕黄色或者棕褐色。图像分析结果提示,与空白对照组相比,轻度缺氧组、中度缺氧组、重度缺氧组TLR-4表达水平升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.本实验说明间歇缺氧环境下大鼠心肌受到了损伤,并且随着间歇缺氧程度的加重,心肌损伤的程度也随着加重;2.大鼠心肌中TLR-4随着间歇缺氧程度的加重表达程度增高,TLR-4介导的炎症信号通路可能进一步导致心肌的损伤;3.通过本实验,我们期望为TLR-4作为OSAHS相关心血管疾病预防及治疗的一个有价值的靶点提供一定的参考依据。
李明花[8]（2019）在《二甲双胍对脓毒症性心肌病保护作用的分子机制研究》文中提出脓毒血症是由细菌感染或者细菌感染释放的内毒素导致的多器官功能障碍和全身性系统反应综合征,在脓毒性休克期间,心脏是最容易受累的器官之一。脓毒症性心肌病（sepsis-induced cardiomyopathy,SIC）是一种与感染相关的心血管疾病。研究表明,临床上至少有50%的脓毒性休克患者被诊断为脓毒症性心肌病,这是由心肌功能障碍引起的,预示着脓毒症性心肌病的预后不良。目前对大肠杆菌和LPS（脂多糖Lipopolysaccharide）诱导的心肌功能障碍的具体机制知之甚少,而且由于其与脓毒症自身的因素混杂在一起,导致临床上对脓毒症性心肌病患者的治疗效果甚微。为了更好地研究脓毒血症心肌损伤病程发展过程中免疫细胞的作用机制,课题组进行了大量药物筛选,发现二甲双胍能有效抑制小鼠及斑马鱼脓毒症性心肌病模型的心肌损伤情况。本课题通过研究脓毒症性心肌病中,小鼠及斑马鱼心脏的病理变化、心肌细胞的种类和形态变化、以及心肌细胞内关键蛋白转位后产生相关细胞因子等变化,初步探讨二甲双胍对脓毒症性心肌病的保护作用机制,为后续脓毒症性心肌病的预防和治疗提供新的思绪。（1）脓毒血症模型组:选择8周龄雌性C57BL/6J小鼠,在小鼠右下腹部腹腔缓慢注射1m L（1.3×108 CFUs/m L）致死剂量菌;（2）二甲双胍预适应保护组（In P）:在小鼠右下腹部腹腔缓慢注射1μg/100μL二甲双胍,间隔2h进行腹腔缓慢注射1m L（1.3×108 CFUs/m L）致死剂量菌;（3）二甲双胍单独作用组:在小鼠右下腹部腹腔缓慢注射1μg/100μL二甲双胍2h;（4）斑马鱼采用LPS浸泡法,其它步骤同上。结论,二甲双胍刺激心肌细胞时,细胞浆内PKC?通过转位至细胞膜并结合Caveolin-3,抑制MAPK/JNK信号通路,通过降低凋亡信号Bcl-2/Bax蛋白比例,抑制细胞凋亡,保护心肌细胞。同时,在线粒体中,通过调节PKC?与IRF4形成复合物,并可能通过释放抗炎因子IL-10,TGF-β,发挥抑制炎症反应作用,从而抑制脓毒症性心肌病的发生发展。
孙欢欢[9]（2019）在《Adropin、TLR4与2型糖尿病大血管病变关系的研究》文中指出目的:观察2型糖尿病（T2DM）患者血清Adropin、TOLL样受体4（TLR4）的变化,探讨Adropin、TLR4与2型糖尿病大血管病变的关系,为阐明Adropin、TLR4在T2DM及其大血管病变发生发展中所起的作用提供一定的理论依据。方法:选择2017年3月至2018年3月在本院内分泌科门诊和住院的73例T2DM患者为研究对象,设为2型糖尿病组。根据颈动脉超声诊断结果分为单纯2型糖尿病组（A组,34例）和2型糖尿病合并大血管病变组（B组,39例）,同时选择35例健康体检者（C组,35例）作为对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清Adropin、TLR4、IL-6指标。同时检测甘油三酯（TG）、同型半胱氨酸（Hcy）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、糖化血红蛋白（HbA1c）等。计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,HOMA-IR=空腹血糖（mmol/L）×空腹胰岛素（mU/L）/22.5。同时,测量每位受试者的身高和体重,并计算体重指数（BMI）=体重（Kg）/身高（m）2。观察和分析三组相关实验指标差异性,并采用多元线性回归和ROC曲线分析Adropin、TLR4等指标对于胰岛素抵抗和2型糖尿病合并大血管病变的临床评估价值。结果:1.2 型糖尿病 A 组和 B 组血清 TLR4、IL-6、Hs-CRP、FBG、FINS、TG、Hcy、BMI、HOMA-IR、HbA1c明显高于正常对照组（C组）（P<0.05）,而血清Adropin蛋白水平均低于正常对照组（C组）（P<0.05）。2型糖尿病B组血清TLR4、IL-6、Hs-CRP、FINS、Hcy、HOMA-IR、HbA1c 明显高于 2 型糖尿病 A 组（P<0.05）,而血清Adropin蛋白水平低于2型糖尿病A组（P<0.05）。血清FBG、TG,以及BMI在A、B组间差异不明显（P>0.05）。2.经 Spearman 相关性分析,血清 Adropin 蛋白与 TLR4、IL-6、Hs-CRP、FBG、FINS、TG、Hcy、BMI、HOMA-IR均呈现明显负相关性（r=-0.685、-0.587、-0.612、-0.216、-0.452、-0.284、-0.553、-0.312、-0.634）（P<0.05）,血清 TLR4 与 Adropin、IL-6、Hs-CRP、FBG、FINS、TG、Hcy、BMI、HOMA-IR 均呈现明显相关性（r=-0.685、0.581、0.605、0.207、0.442、0.251、0.463、0.342、0.624）（P<0.05）。3.多元直线回归分析显示,Adropin、TLR4、IL-6和Hcy等四个指标纳入了最后预测胰岛素抵抗指数的直线回归模型,调整后的决定系数R2=0.486。依据标准化回归系数判断,对于HOMA-IR影响程度由大到小分别是Adropin、TLR4、IL-6和Hcy,其中,Adropin与HOMA-IR呈负相关关系。4.ROC曲线分析显示,Adropin、TLR4对于预测T2DM患者发生大血管病变的AUC 面积为最高,分别是 0.864（95%CI:0.775～0.943）和 0.837（95%CI:0.745～0.925）,敏感性和特异性分别是89.3%和88.7%、88.4%和87.5%。进一步采用二元Logistic逐步概率化处理,得到Adropin、TLR4联合预测的AUC面积为0.904（95%CI:0.812～0.973）,AUC面积得到进一步增加,其敏感性和特异性分别是80.1%和93.6%。结论:1.对于2型糖尿病合并大血管病变患者,血清Adropin水平低于单纯2型糖尿病组,而血清TLR4水平高于单纯2型糖尿病组。2.血清Adropin、TLR4与胰岛素抵抗间存在明显关联,是胰岛素抵抗指数变化的重要影响因素。3.血清Adropin、TLR4对于2型糖尿病合并大血管病变具有重要临床预测价值,多指标联合预测的临床价值会更好。
周吉[10]（2019）在《血清骨桥蛋白、Toll样受体4在2型糖尿病中的变化及意义》文中研究表明目的 探讨血清骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）在2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）中的变化及与 Toll 样受体 4（Toll-like receptor 4,TLR4）等炎症指标的关系。方法 选取2017年03月至2018年03月在张家港市第一人民医院内分泌科新诊断的T2DM患者102例,其中男76例,女26例,年龄19～84岁,按体重指数（Body mass index,BMI）分 3 组,DM 正常体重组（18.5 kg/m2≤BMI<24 kg/m2,n=34）、DM 超重组（24 kg/m2≤BMI<28 kg/m2,n=34）、DM 肥胖组（BMI≥28 kg/m2,n=34）,另选34名年龄、性别匹配的正常人作为对照组。检测各组血清OPN、TLR4、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、超敏 C 反应蛋白（High sensitivity C reactive protein,hsCRP）、空腹血糖（Fasting blood glucose,FBG）、空腹胰岛素（Fasting insulin,FINS）、糖化血红蛋白（Glycated hemoglobin,HbAlC）、甘油三酯（Triglycerides,TG）、总胆固醇（Total cholesterol,TC）、低密度胆固醇（Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（High density lipoprotein cholesterol,HDL-C）水平,并计算胰岛素抵抗指数（Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）。采用SPSS 23统计软件处理数据,比较各组之间指标的差异,分析OPN、TLR4、IL-6、hsCRP炎症因子和 FBG、HbAlC、TG、TC、LDL-C、HDL-C、BMI、HOMA-IR、腰围（Waist circumference,WC）之间的相关性。结果 T2DM各亚组OPN、TLR4、IL-6、hsCRP水平显着高于对照组（P<0.05或P<0.01）。多元logistics回归模型显示,即使校正肥胖指标、TLR4、IL-6、hsCRP、血脂谱等混杂因素,T2DM患病风险随着血清OPN浓度增加逐渐升高。Pearson相关分析显示血清OPN、TLR4和其他临床指标相关性均无统计学差异（P>0.05）。结论 血清OPN浓度在T2DM患者中显着升高,并和T2DM患病风险相关,但未发现其与TLR4等炎症因子存在关联。
二、Toll样受体4与心血管疾病（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Toll样受体4与心血管疾病（论文提纲范文）
（1）晚期糖基化终末产物与MD2-TLR4结合介导心脏衰老的机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 晚期糖基化终末产物与MD2-TLR4 结合介导心脏衰老细胞水平的研究及结果 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验细胞 |
| 1.1.2 主要试剂和耗材 |
| 1.1.3 仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细胞复苏 |
| 1.2.2 细胞培养及传代 |
| 1.2.3 分组及干预 |
| 1.2.4 心肌细胞相关指标ELISA水平测定 |
| 1.2.5 心肌细胞相关指标蛋白表达水平测定 |
| 1.2.6 心肌细胞相关指标m RNA表达水平测定 |
| 1.3 统计学方法 |
| 1.4 结果 |
| 1.4.1 细胞复苏后的镜下表现 |
| 1.4.2 四组干预的镜下结果 |
| 1.4.3 心肌细胞ELISA结果 |
| 1.4.4 心肌细胞IL-6、TNF-αm RNA相对表达量结果 |
| 1.4.5 心肌细胞My D88 免疫印迹检查结果 |
| 2 晚期糖基化终末产物与MD2-TLR4 结合介导心脏衰老的机制动物水平的研究及结果 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要试剂和耗材 |
| 2.1.3 仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 分组 |
| 2.2.2 心脏超声检查 |
| 2.2.3 麻醉及解剖 |
| 2.2.4 血浆ELISA指标检测 |
| 2.2.5 心肌组织HE染色 |
| 2.2.6 心肌组织Masson染色 |
| 2.2.7 心肌组织相关指标m RNA表达水平测定 |
| 2.2.8 心肌组织相关指标蛋白表达水平测定 |
| 2.3 统计学方法 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 血浆ELISA结果 |
| 2.4.2 大鼠心肌组织HE染色结果 |
| 2.4.3 大鼠心肌组织Masson染色结果 |
| 2.4.4 心脏超声检查结果 |
| 2.4.5 心肌My D88、Ik Bα 、IL-6 m RNA相对表达量结果 |
| 2.4.6 心肌组织AGEs、TLR4、MD2 免疫印迹检查结果 |
| 3 晚期糖基化终末产物与MD2-TLR4-结合介导心脏衰老临床水平的研究及结果 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 统计学方法 |
| 3.4 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 TLR4/MD2 信号通路与心血管疾病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附图 1 伦理审批表扫描件 |
| 致谢 |
（2）肺炎支原体与川崎病相关性分析及发病机制研究（论文提纲范文）
| 主要缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 肺炎支原体与川崎病相关性分析 |
| 1.资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 数据收集 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 第二部分 体外实验探讨川崎病发病机制 |
| 1.技术路线图 |
| 2.实验材料 |
| 3.实验方法 |
| 3.1 Mp-LAMPs的提取 |
| 3.2 体外实验炎症指标检测 |
| 3.3 体外实验中线粒体功能及自噬检测 |
| 3.4 统计学方法 |
| 4.体外实验结果 |
| 5.讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 肺炎支原体与川崎病发病机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）基于Toll样受体信号介导炎症反应探讨温针灸对自发性高血压大鼠的抗炎机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 温针灸对自发性高血压大鼠血压及炎症状态的调控作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 温针灸对自发性高血压大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路调控机制研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 温针灸通过调控炎症反应发挥对自发性高血压大鼠内皮细胞保护作用的机制 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附图1 Toll样受体家族及其信号传导通路 |
| 附图2 Toll受体信号通路影响血压机制 |
| 附图3 动物实验技术路线图 |
| 附图4 qPCR实验过程中部分扩增曲线 |
| 附图 5qPCR实验过程中部分熔解曲线 |
| 综述 |
| 综述一 TLRs通路各层级在高血压病及免疫功能调节中的作用机理分析 |
| 综述二 针灸调节血压及免疫功能机制的研究进展 |
| 综述三 高血压病与炎症因子之间的相关性分析 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（4）基于“肝—肠”轴探讨冠心宁片抗西藏小型猪AS的作用及机制（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 冠心宁片抗西藏小型猪AS的作用及机制探讨 |
| 一、实验材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 试验药物 |
| 2. 实验动物与实验条件 |
| 3. 主要试剂 |
| 4. 主要仪器 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 小型猪AS模型的建立及GXN干预 |
| 2. 血液生化指标检测 |
| 3. 炎症指标的检测 |
| 4. 糖耐量试验 |
| 5. 主动脉大体脂质染色分析 |
| 6. 主动脉病理形态学观察 |
| 7. 西藏小型猪主动脉转录组测序与分析 |
| 8. 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| (一) GXN对西藏小型猪AS模型的影响 |
| 1. GXN对西藏小型猪AS模型脂代谢的影响 |
| 2. GXN对西藏小型猪AS模型糖代谢和糖耐量的影响 |
| 3. GXN对西藏小型猪AS模型炎症因子的影响 |
| 4. GXN对西藏小型猪AS模型血管组织病理形态和主动脉脂质沉积的影响 |
| (二) 西藏小型猪主动脉转录组学分析结果 |
| 1. 数据过滤结果 |
| 2. 差异基因的筛选 |
| 3. GSEA富集分析 |
| 4. GO-BP和KEGG途径富集分析 |
| 5. 共有差异基因的PPI网络构建和Hub基因筛选 |
| 三、分析与讨论 |
| (一) GXN对高脂诱导西藏小型猪AS模型的作用 |
| 1. 对糖脂代谢和胰岛素抵抗的影响 |
| 2. 对炎症反应的影响 |
| 3. 对AS斑块的影响 |
| (二) 主动脉转录组学分析GXN抗高脂诱导西藏小型猪AS的作用机制 |
| 1. 对类固醇生物合成途径的影响 |
| 2. 对胰岛素分泌途径的影响 |
| 3. 对炎症途径的影响 |
| (三) GXN抗AS的分子网络和核心基因的筛选 |
| 四、小结 |
| 第二部分 基于“肝-肠”轴探讨冠心宁片抗西藏小型猪AS的作用机制 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 主要试剂 |
| 2. 主要仪器 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 肝脏TC、TG、SOD和MDA含量的检测 |
| 2. 肝脏和小肠病理形态学观察 |
| 3. 西藏小型猪肝脏、小肠转录组测序与分析 |
| 4. 西藏小型猪肠道菌群的测定 |
| 5. 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| (一) GXN对西藏小型猪AS模型肝脏和小肠的影响 |
| 1. GXN对西藏小型猪AS模型肝脏TC和TG水平的影响 |
| 2. GXN对西藏小型猪AS模型肝脏SOD活性和MDA含量的影响 |
| 3. GXN对西藏小型猪AS模型肝脏病理形态的影响 |
| 4. GXN对西藏小型猪AS模型小肠病理形态的影响 |
| (二) 西藏小型猪肝脏转录组学分析结果 |
| 1. 数据过滤结果 |
| 2. 差异基因的筛选 |
| 3. GSEA富集分析 |
| 4. GO-BP和KEGG途径富集分析 |
| 5. 肝脏差异基因的PPI网络构建和Hub基因筛选 |
| (三) 西藏小型猪小肠转录组学分析结果 |
| 1. 数据过滤结果 |
| 2. 差异基因的筛选 |
| 3. GSEA富集分析 |
| 4. GO-BP和KEGG富集分析 |
| 5. 小肠差异基因的PPI网络构建和Hub基因筛选 |
| (四) GXN对西藏小型猪AS模型肠道菌群的影响 |
| 1. 数据优化及OTU分布Venn分析 |
| 2. α-多样性分析 |
| 3. β-多样性分析 |
| 4. 从门和纲水平上分析各组小型猪肠道菌群组成变化 |
| 5. 从目和科水平上分析各组小型猪肠道菌群组成变化 |
| 6. 从属水平上分析各组小型猪肠道菌群组成变化 |
| 7. LEfSe分析 |
| 三、分析与讨论 |
| (一) GXN对西藏小型猪AS模型肝脏的影响 |
| (二) 转录组学分析GXN对西藏小型猪AS模型肝脏的作用机制 |
| (三) 转录组学分析GXN对西藏小型猪AS模型小肠的作用及机制 |
| (四) GXN对西藏小型猪AS模型肠道菌群的影响 |
| (五) 基于“肝-肠”轴分析GXN抗AS的作用机制 |
| 四、小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
（5）Toll样受体4水平与慢性心力衰竭的相关性分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 CHF组与非CHF组患者一般临床资料比较 |
| 2.2 TLR4与CHF病因的关系 |
| 2.3 CHF组与非CHF组患者TLR4、BNP及 LVEDD、LVEF的比较 |
| 2.4 CHF组在不同NYHA分级间TLR4、BNP及 LVEDD、LVEF的比较 |
| 2.5 CHF组间TLR4与BNP、心功能分级、LVEDD、LVEF的相关性 |
| 2.6 TLR4与BNP诊断心力衰竭的ROC曲线 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）细粒棘球蚴囊液体外保护脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9C2损伤的效果评价及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词对照表 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 心肌炎(myocarditis) |
| 1.1.1 心肌炎的临床表现 |
| 1.1.2 心肌炎的诊断和治疗 |
| 1.2 内毒素引起心肌炎的致病机制 |
| 1.2.1 内毒素通过诱导产生细胞因子对心肌细胞产生损伤 |
| 1.2.2 内毒素通过激活TLR4/NF-κB信号通路对心肌细胞产生损伤 |
| 1.2.3 内毒素通过诱发氧化应激反应对心肌细胞产生损伤 |
| 1.2.4 内毒素通过诱导细胞凋亡损伤心肌细胞 |
| 1.3 细粒棘球蚴囊液 |
| 1.4 本课题立项依据 |
| 1.5 技术路线 |
| 第二章 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞损伤的保护作用研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.3 细粒棘球蚴囊液蛋白定量及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)蛋白定性 |
| 2.4 H9C2 细胞、HUVEC细胞培养 |
| 2.5 细粒棘球蚴囊液体外对H9C2 细胞、HUVEC细胞生长的影响 |
| 2.6 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞损伤的形态学影响 |
| 2.7 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞损伤的细胞生存率的影响.. |
| 2.8 数据统计分析 |
| 2.9 实验结果 |
| 2.10 讨论 |
| 2.11 结论 |
| 第三章 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞损伤保护作用的机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞损伤的凋亡水平的影响 |
| 3.4 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2 细胞损伤的ROS水平的影响 |
| 3.5 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2 细胞损伤中tlr4、p38、NF-κB和 Il6 mRNA水平的影响 |
| 3.6 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2 细胞损伤中TLR4/NF-κB信号通路相关TLR4、磷酸化p38、NF-κB蛋白表达的影响 |
| 3.7 数据统计分析 |
| 3.8 实验结果 |
| 3.8.1 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2细胞损伤的凋亡水平的影响 |
| 3.8.2 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2 细胞损伤的ROS水平的影响 |
| 3.8.3 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2 细胞损伤中tlr4、p38、NF-κB、Il6 mRNA水平的影响 |
| 3.8.4 细粒棘球蚴囊液对LPS诱导H9C2 细胞损伤TLR4/NF-κB信号通路TLR4、磷酸化p38、NF-κB蛋白表达的影响 |
| 3.9 讨论 |
| 3.10 结论 |
| 第四章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（7）间歇缺氧对心肌的损害及TLR-4在心肌中的表达（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 间歇缺氧与OSAHS |
| 1.2 OSAHS与心脏损伤 |
| 1.2.1 OSAHS造成心脏损伤的病理机制 |
| 1.2.2 OSAHS与心血管疾病 |
| 1.3 Toll样受体-4 |
| 1.3.1 TLR-4的结构 |
| 1.3.2 TLR-4的信号通路 |
| 1.4 TLR-4在OSAHS所致心肌损伤中的作用 |
| 1.5 大鼠间歇缺氧模型的建立 |
| 第二章 材料 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要实验器材 |
| 2.3 主要实验试剂 |
| 第三章 实验方法 |
| 3.1 实验动物分组 |
| 3.2 间歇性低氧模型的建立 |
| 3.2.1 动物饲养仓 |
| 3.2.2 气体输送装置 |
| 3.2.3 气体输送控制装置 |
| 3.3 标本采集 |
| 3.4 大鼠心脏组织HE染色 |
| 3.5 免疫组化法观察大鼠心脏组织 TLR-4 表达情况 |
| 3.6 统计学处理 |
| 第四章 实验结果 |
| 4.1 光学显微镜下观察大鼠心脏组织HE染色 |
| 4.2 免疫组化法检测大鼠心脏组织TLR-4表达情况 |
| 第五章 讨论 |
| 第六章 研究不足与展望 |
| 第七章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（8）二甲双胍对脓毒症性心肌病保护作用的分子机制研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 脓毒症 |
| 1.1.1 脓毒症的致病菌 |
| 1.1.2 脓毒症的发病机制 |
| 1.1.3 脓毒症的特征 |
| 1.1.4 脓毒症的治疗 |
| 1.2 中性粒细胞 |
| 1.2.1 中性粒细胞的基本特征 |
| 1.2.2 中性粒细胞的迁移及活化 |
| 1.2.3 中性粒细胞的功能 |
| 1.3 脓毒症与心肌损伤 |
| 1.3.1 脓毒症性心肌病 |
| 1.3.2 脓毒症性心肌病的特征 |
| 1.3.3 心肌细胞 |
| 1.3.4 脓毒性心肌损伤的机制 |
| 1.4 Toll样受体家族 |
| 1.4.1 Toll样受体 |
| 1.4.2 TLR2 |
| 1.4.3 TLR4 |
| 1.5 干扰素调控因子家族 |
| 1.5.1 干扰素调控因子 |
| 1.5.2 IRF4 |
| 1.5.3 IRF5 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料与设备 |
| 2.1.1 菌种 |
| 2.1.2 试剂与材料 |
| 2.1.3 实验动物 |
| 2.1.4 细胞培养 |
| 2.1.5 细胞转染 |
| 2.1.6 原代心肌细胞的分离与培养 |
| 2.1.7 细胞膜分离 |
| 2.1.8 线粒体分离 |
| 2.1.9 主要实验设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 二甲双胍介导的脓毒症性心肌病保护模型 |
| 2.2.2 大肠杆菌JM109菌种的制备 |
| 2.2.3 大肠杆菌相对应菌液浓度的测定 |
| 2.2.4 大肠杆菌工作菌液的制备 |
| 2.2.5 小鼠心脏病理损伤 |
| 2.2.6 定量PCR |
| 2.2.7 蛋白免疫印迹 |
| 2.2.8 免疫共沉淀 |
| 2.2.9 ELISA检测细胞因子IL-10/TNF-α含量 |
| 2.2.10 免疫荧光检测IRF4/与PKC定位表达 |
| 2.2.11 斑马鱼实验相关步骤 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 离体模型建立及细胞实验结果 |
| 3.1.1 Metformin对LPS诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤模型的保护作用 |
| 3.1.2 MTT法检测LPS对H9c2细胞活性的影响 |
| 3.1.3 ELISA检测LPS对H9c2细胞分泌细胞因子的影响 |
| 3.1.4 Metformin不同浓度对H9c2细胞生存率的影响 |
| 3.1.5 Metformin对H9c2细胞中MAPK信号转导的影响 |
| 3.1.6 Metformin对H9c2细胞中MAPK蛋白荧光的影响 |
| 3.1.7 Metformin对大鼠心肌细胞中MAPK信号转导的影响 |
| 3.2 脓毒症性心肌病体内模型实验及机制探讨 |
| 3.2.1 Metformin对LPS造模斑马鱼生存期的影响 |
| 3.2.2 Metformin对斑马鱼脓毒症性心肌病体内模型的影响 |
| 3.2.3 Metformin对斑马鱼脓毒症性心肌病心脏体积的影响 |
| 3.2.4 Metformin对斑马鱼脓毒症性心肌病模型体内细胞因子的影响 |
| 3.2.5 Metformin对脓毒血症小鼠生存率的影响 |
| 3.2.6 Metformin对小鼠外周血中细胞因子的影响 |
| 3.2.7 Metformin对小鼠心肌组织的保护作用 |
| 3.2.8 Metformin对小鼠心肌组织IRF4蛋白表达的影响 |
| 3.2.9 Metformin对心肌细胞中Cav-3 与PKCε蛋白共定位的影响 |
| 3.2.10 荧光共振能量转移实验检测Metformin对心肌细胞中PKCε由细胞浆转位至线粒体的影响 |
| 3.2.11 Metformin对心肌细胞中PKCε由细胞浆转位的影响 |
| 3.2.12 Metformin对心肌细胞中IRF4由细胞浆转位至线粒体的影响 |
| 3.2.13 Metformin对心肌细胞线粒体内IRF4与PKCε蛋白偶联的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（9）Adropin、TLR4与2型糖尿病大血管病变关系的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 对象与方法 |
| 1.研究对象 |
| 1.1 2型糖尿病组 |
| 1.2 正常对照组(C组) |
| 2. 研究方法 |
| 2.1 体格指标的测定 |
| 2.2 生化指标的测定 |
| 2.3 血清Adropin、TLR4、IL-6测定 |
| 2.4 颈动脉超声检查 |
| 3. 统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 三组观察指标比较 |
| 2. 血清Adropin、TLR4与其它检测指标相关性分析 |
| 3. 胰岛素抵抗指数的多元线性回归分析 |
| 4. ROC曲线分析各指标预测糖尿病患者发生大血管病变的临床价值 |
| 讨论 |
| 1. 2型糖尿病发生大血管病变的病理生理基础 |
| 2. Adropin与2型糖尿病合并大血管病变相关性 |
| 3. TLR4与2型糖尿病合并大血管病变相关性 |
| 4. Hs-CRP、IL-6、Hcy与2型糖尿病大血管病变的相关性 |
| 5. Adropin、TLR4与2型糖尿病大血管病变关系的探讨 |
| 结论 |
| 展望 |
| 1. 本研究的不足之处 |
| 2. 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 Adropin、TLR4与大血管病变关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 致谢 |
（10）血清骨桥蛋白、Toll样受体4在2型糖尿病中的变化及意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究存在的局限性及展望 |
| 参考文献 |
| 综述 血清骨桥蛋白和内分泌代谢疾病相关性研究 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 致谢 |
四、Toll样受体4与心血管疾病（论文参考文献）
- [1]晚期糖基化终末产物与MD2-TLR4结合介导心脏衰老的机制研究[D]. 魏潇琪. 福建医科大学, 2021(02)
- [2]肺炎支原体与川崎病相关性分析及发病机制研究[D]. 林含. 福建医科大学, 2021(02)
- [3]基于Toll样受体信号介导炎症反应探讨温针灸对自发性高血压大鼠的抗炎机制[D]. 金圣博. 辽宁中医药大学, 2020(01)
- [4]基于“肝—肠”轴探讨冠心宁片抗西藏小型猪AS的作用及机制[D]. 郁晨. 浙江中医药大学, 2020(01)
- [5]Toll样受体4水平与慢性心力衰竭的相关性分析[D]. 靳妮. 山西医科大学, 2020(12)
- [6]细粒棘球蚴囊液体外保护脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9C2损伤的效果评价及机制研究[D]. 陈冲. 兰州大学, 2020(01)
- [7]间歇缺氧对心肌的损害及TLR-4在心肌中的表达[D]. 黄丽华. 兰州大学, 2020(01)
- [8]二甲双胍对脓毒症性心肌病保护作用的分子机制研究[D]. 李明花. 吉林大学, 2019(02)
- [9]Adropin、TLR4与2型糖尿病大血管病变关系的研究[D]. 孙欢欢. 苏州大学, 2019(02)
- [10]血清骨桥蛋白、Toll样受体4在2型糖尿病中的变化及意义[D]. 周吉. 苏州大学, 2019(02)