一、草鱼实验性镉中毒的肝、肾病理学研究（论文文献综述）
霍俊凤[1]（2018）在《镉在乌龟的毒代动力学及其对肝肾损伤的研究》文中指出水生态系统中的镉污染主要来源于采矿、冶金、电镀、皮革等工业活动和农药、化肥等农业活动。随着工业和农业的迅速发展,水生态环境的污染面临严峻挑战。近年来,重金属镉污染事件层出不穷,湖南镉大米事件,广西龙江河镉污染事件等对社会造成极大的危害,迫切需要寻找一种理想的指示生物对水环境中的镉及其他重金属污染状况进行监测。乌龟（Chinemys reevesii）在我国淡水水域分布广泛,同时乌龟是位于食物链上层的水生动物,其杂食性的特点使其对重金属镉有很强的富集能力,对镉污染有生物放大效应,是一种比较理想的指示生物。在此背景下,本博士学位论文借助生理学、生物化学、病理学、分析化学、分子生物学等手段采用单次腹腔注射氯化镉染毒对镉在乌龟体内毒代动力学进行研究,并采用梯度浓度氯化镉染毒进行镉对乌龟肝脏和肾脏损伤的研究,为乌龟作为理想的环境监测指示生物提供充分的理论依据,因此本研究有重要的科学价值。研究方法:镉在乌龟体内毒代动力学研究采用15 mg/kg氯化镉为染毒剂量进行单次腹腔注射染毒,对镉的吸收、在不同组织器官的分布、不同途径排泄镉含量进行检测,并对血浆中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活力及还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、总蛋白（TP）含量的动态变化进行监测。为了探讨镉暴露对乌龟肝、肾损伤的机理,实验采用体重为130±10 g乌龟为材料,进行梯度浓度（7.5 mg/kg、15 mg/kg、30 mg/kg）镉染毒,并于染毒后1周、2周和3周各组分别取5只乌龟进行实验研究。肉眼观察肝脏和肾脏的整体病理改变,用显微镜和透射电镜观察肝脏和肾脏的组织结构和超微结构的病理变化。采用生物化学和分子生物学等方法对镉引起的乌龟肝脏脂质过氧化损伤相关指标SOD、CAT、GSH和MDA进行检测和对肝组织细胞金属硫蛋白（MT）、SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化物酶4（Gpx4）和多聚核苷酸激酶磷酸化酶（PNKP）基因mRNA的差异表达进行检测,并对肾脏脂质过氧化损伤相关指标SOD、CAT、GSH、MDA进行检测和肾功能损伤相关指标肌酐（CRE）和尿素氮（BUN）进行检测。1.毒代动力学研究发现镉腹腔染毒后迅速吸收进入血液,并在3小时达到峰值;镉在肝中的积累量最高,其次是胰脏,此外,镉在脾、肾、肠、肺、胃、心、脑、肌肉也有不同程度的积累;在粪、尿、胆汁中镉含量检测发现粪中有少量镉存在,而尿液和胆汁中镉含量非常低。染毒乌龟血浆中SOD、CAT活力较对照组出现差异显着的波动性升降动态改变,染毒后3小时、1周、2周和4周SOD活性较对照组极显着的降低,而在8周SOD活性较对照组极显着的升高。在染毒后3小时、6小时、12小时和1天CAT活性较对照组极显着的升高,而在1周、2周和4周CAT活性较对照组显着降低。GSH含量在整个实验期间出现较对照组显着降低的波动性变化,而MDA含量在整个实验期间较对照组出现显着升高的动态改变。染毒乌龟血浆中ALT、AST活力与对照组表现出差异显着的波动性升高。2.在镉对乌龟肝脏损伤的研究中发现,伴随镉染毒剂量的增加,眼观肝脏出现不同程度的淤血、肿大、变黄等病变;显微镜下观察肝细胞呈现不同程度的肿大、变性、坏死;透射电镜观察发现,随着镉暴露剂量的增加,肝细胞核出现变形、核膜缺失、染色质边集等变化;细胞线粒体出现肿胀、膜缺失甚至解体;内质网膨胀、扭曲、折断,大量的核糖体脱落;脂滴和溶酶体显着增多;肝绒毛缺失等剂量依赖性的病理改变。肝组织SOD活性和GSH含量伴随染毒时间的延长出现先升高后降低的变化,而CAT活性均呈现降低的趋势,MDA含量较对照组均有所升高。在染毒2周对乌龟肝组织MT、SOD、CAT、Gpx4和PNKP基因mRNA表达量进行了检测,发现MT、SOD基因的mRNA表达量在30 mg/kg染毒组较对照组出现极显着升高。3.在镉对乌龟肾脏损伤的研究中发现,伴随镉染毒剂量的增加,乌龟的双肾眼观出现淤血、颜色变暗无光泽等病变。显微镜下观察7.5 mg/kg组、15 mg/kg组染毒乌龟部分肾小管细胞出现不同程度的肿胀、变性、空泡化,30 mg/kg组,染毒乌龟肾小管细胞出现细胞空泡化、变性坏死等严重的形态学改变,细胞边界模糊,肾小球淤血,肾小囊腔变窄。透射电镜观察实验龟肾组织细胞超微结构发现,在7.5 mg/kg、15 mg/kg组,染毒龟肾细胞出现不同程度的脂滴增多、刷状缘不整齐、线粒体和内质网损伤等超微结构的改变。在30 mg/kg组,染毒龟肾细胞排列疏松,细胞线粒体出现肿胀、膜缺失、基质密度降低、甚至破裂解体等超微结构的改变;粗面内质网膨胀、扭曲,大量核糖体脱落;自噬溶酶体显着增多;细胞的绒毛断裂或缺失。对染毒龟肾组织匀浆上清液中SOD、CAT活性和GSH、MDA含量检测,发现肾组织SOD活性伴随染毒时间的延长总体呈现先升高后降低的趋势并存在剂量依赖性。而研究结果:CAT活性、GSH含量伴随染毒时间的延长出现与对照组差异极显着的剂量依赖性的降低,MDA含量伴随染毒时间的延长则出现与对照组差异极显着的剂量依赖性的升高。对染毒龟血浆中CRE和BUN含量检测发现血浆CRE和BUN含量在不同染毒剂量组不同染毒时间均较对照组升高。研究结论:1.毒代动力学研究表明,乌龟染毒后镉迅速吸收入血,在3小时达到峰值;肝和胰脏是镉积累的靶器官;粪便可能是镉排泄的主要途径。镉降低了机体抗氧化能力,使血浆中脂质过氧化产物增多,说明镉引起了氧化应激和损伤。ALT、AST活力的升高说明镉引起了肝功能损伤。2.镉对乌龟肝组织损伤机理的研究发现镉诱导了乌龟肝组织结构超微结构损伤,并且存在剂量依赖性;镉诱导了乌龟肝组织脂质过氧化损伤;镉对乌龟肝组织MT、SOD基因mRNA表达产生了显着的影响。3.镉对乌龟肾组织损伤机理的研究发现镉诱导了乌龟肾组织结构超微结构损伤,并且存在剂量依赖性;镉诱导了乌龟肾组织脂质过氧化损伤;影响了乌龟肾脏功能。
吴勇亮[2]（2018）在《镉胁迫与净化对草鱼镉蓄积和MATE基因表达影响的研究》文中认为草鱼（Ctenopharyngodon idellus）是我国产量最大,养殖最为广泛的经济鱼类之一。但随着中国工农业生产的发展,水环境中镉（Cadmium,Cd）污染问题日益严重,使草鱼养殖甚至是人们的健康都受到严重的威胁。因此,了解草鱼重金属的代谢途径,寻找有效降低体内镉浓度的方法十分重要。多药及毒素外排转运蛋白（Multidrug and toxic compound extrusion family,MATE）是一类可将多种金属离子等从机体细胞中排出的多功能转运体,可有效减少毒性物质在机体内残留蓄积。本文通过设计草鱼镉胁迫—净化试验,以1/2镉的96 h半数致死浓度(96 hours Lethal Concentration 50,96 h LC50)胁迫4天,随后进行无镉净化10天,期间检测草鱼鳃丝、肝胰脏、肾脏和肌肉四个组织器官中的镉蓄积浓度动态变化,并测定MATE3、MATE5、MATE6基因的相对表达量,探讨不同组织器官中MATE3、MATE5、MATE6基因、镉蓄积浓度、镉胁迫净化时间三者间的关系,进一步了解MATE对镉外排作用,为后期鱼类MATE基因在重金属镉外排的研究提供科学依据和基础资料。试验结果如下:1、运用寇氏法计算获得镉对草鱼的96 h LC50为6.30 mg/L,并以1/2 96 h LC50开展胁迫—净化试验。在镉胁迫试验中,草鱼鳃丝、肝胰脏、肾脏和肌肉中的镉浓度均明显上升,分别在胁迫后24 h、72 h、48 h、24 h达到蓄积高峰,最高浓度依次为9.97mg/kg、7.63 mg/kg、7.30 mg/kg、0.40 mg/kg。在净化期间,鳃丝和肌肉的镉浓度与胁迫期间相比,变化较小,而肝胰脏和肾脏的镉浓度却呈现持续大幅增长模式。并通过社会科学统计软件包（Statistical Package for Social Science,SPSS 20.0）分析可知肝胰脏与肾脏的镉浓度一直呈极显着正相关关系（P<0.01）,鳃丝与肌肉的镉浓度随着胁迫时间的增加呈显着正相关（P<0.05）。2、应用实时荧光定量对镉胁迫—净化试验期间草鱼鳃丝、肝胰脏、肾脏和肌肉中MATE3、MATE5、MATE6 mRNA的相对表达量进行测定。在镉胁迫期间,与对照组相比,草鱼鳃丝MATE3 mRNA在胁迫后96 h显着性上升（P<0.05）,MATE5、MATE6 mRNA则一直呈表达抑制现象（P<0.05）;肝胰脏MATE3 mRNA只有在胁迫12 h显着升高（P<0.05）,然后恢复正常,MATE5表达量变化较大,胁迫后表达量立即上升,在6-24h分别提升了2.70（P<0.05）、1.40、2.17（P<0.05）倍,然后回落到正常水平;MATE6表达量一直较低（P<0.05）;肾脏MATE基因的表达量在胁迫后均明显上升,MATE3、MATE5、MATE6分别在胁迫6 h、12 h、6 h达到胁迫期间的最高表达量（P<0.05）;肌肉中MATE3 mRNA表达量在镉胁迫期间变化不明显,MATE5在胁迫24 h和96 h表达量显着性升高（P<0.05）,MATE6一直处于抑制表达状态（P<0.05）。在胁迫后的净化试验中,与对照组相比,草鱼鳃丝MATE3、MATE5、MATE6基因表达呈先升后降,均在净化12 h达至表达最高值（P<0.05）;肝胰脏MATE3、MATE5、MATE6基因均在净化48 h达至表达量最大值（P<0.05）,而后表达恢复正常或进一步下降;肾脏MATE3、MATE5、MATE6基因表达量均在净化216 h达至最大值（P<0.05）,其中MATE5表达量一直维持较高水平（P<0.05）;肌肉MATE3、MATE5、MATE6基因表达处于抑制表达状态（P<0.05）。3、草鱼鳃丝MATE3、MATE5、MATE6 mRNA在净化初期出现高表达现象,同时伴随着镉浓度下降,并降至镉浓度的最低点;在含镉环境下,草鱼肝胰脏镉浓度增长速率随着MATE5表达量下降而增大,净化期间MATE3、MATE5、MATE6被高浓度镉诱导表达,进而出现肝胰脏中镉浓度下降现象;草鱼肾脏MATE3、MATE5、MATE6在含镉环境下随着镉浓度上升而被诱导表达,并在胁迫后期呈现镉浓度处于动态平衡状态,在净化期间MATE3、MATE5会因镉大量蓄积而被诱导高表达,并在高表达后出现镉浓度下降现象。综上所述,草鱼鳃丝、肝胰脏、肾脏、肌肉对重金属镉均有蓄积作用,其中肝胰脏、肾脏为镉的主要蓄积器官。MATE3、MATE5和MATE6基因在草鱼鳃、肝胰脏、肾脏中均参与镉外排作用,其中MATE5是肝胰脏、肾脏中镉外排的主要蛋白。对于MATE的转运机制需进一步的研究探讨。
夏晓华,卢辰华,李墨溢,王坡,董慧,高亚丹,常重杰[3]（2016）在《乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的毒性研究》文中研究说明为了检测除草剂乙氧氟草醚对水生生物的毒性,以大鳞副泥鳅（Paramisgurnus dabryanus）为受试对象,研究乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的急性毒性、生理毒性和DNA损伤程度。结果显示,随着染毒剂量的增加和染毒时间的延长,大鳞副泥鳅的死亡率升高。乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅24 h、48 h、72 h、96 h的半数致死质量浓度（LC50）分别为41.87 mg/L、36.62 mg/L、29.96 mg/L、25.62mg/L,安全质量浓度为8.40 mg/L。生理毒性试验结果显示,15.5 mg/L乙氧氟草醚染毒6 d,大鳞副泥鳅血液中谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）活力值最大,与对照（0 mg/L）相比差异极显着。整体上,GPT和GOT活力随着染毒时间的延长和染毒剂量的升高呈上升趋势。通过单细胞凝胶电泳研究乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的DNA损伤,试验结果显示,6 d时试验处理组彗尾DNA百分含量、彗星尾长和Olive尾矩与对照相比均具有极显着差异（P<0.01）。表明,乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅具有一定的毒性和DNA损伤效应,应适量施用。
夏冰[4]（2016）在《钼镉联合诱导对麻鸭卵巢抗氧化功能及相关基因表达量的影响》文中指出为了探究钼镉联合暴露对鸭卵巢的组织学、抗氧化能力及相关基因表达量的影响,本研究选取360只11日龄“江南2号”麻鸭,并随机分成6组,每组60只,分别是Control组、钼Ⅰ组、钼Ⅱ组、镉组、钼镉联合Ⅰ组和钼镉联合Ⅱ组。Control组饲喂基础日粮,其余各组饲料分别在每千克基础日粮中添加15 mg Mo、100 mg Mo、4 mg Cd、15 mg Mo+4 mg Cd以及100 mg Mo+4 mg Cd。实验选用七钼酸铵[（NH4）6Mo7O24·4H2O]作为钼源,硫酸镉（3Cd SO4·8H2O）为镉源。试验期为120d。在试验进行至第60d、90d和120d时,每组随机选取10只麻鸭,剖杀并采集卵巢组织。检测卵巢组织匀浆的抗氧化指标,炎症细胞因子基因NF-κB、TNF-α、COX-2,凋亡基因Bcl-2、Bak-1和Caspase-3及CP基因mRNA的表达量;同时,制作120d卵巢组织病理切片和超薄切片,观察卵巢组织学变化和细胞超微结构变化。结果如下:1.钼镉共同作用导致卵巢组织匀浆中T-AOC、SOD、XOD、CAT酶活性显着降低（P<0.05）,NOS活性和MDA含量增加（P<0.05）;2.钼镉共同作用导致卵巢细胞膜损伤,线粒体肿胀、空泡化、嵴断裂,细胞器溶解,核固缩,核膜破裂;3.低剂量的钼（15 mg/kg Mo）和高剂量的钼（100 mg/kg Mo）对卵巢组织的损伤程度较轻。镉（4 mg/kg Cd）对卵巢组织的损伤程度大于低钼和高钼,导致部分卵泡发育不良,充血、出血明显。钼镉联合处理对卵巢组织的损伤更加严重,其中,高钼镉（100 mg/kg Mo+4 mg/kg Cd）导致大量卵泡发育不良,出血、坏死程度加剧及面积增大,大量结缔组织呈纤维素性坏死,对卵巢组织造成的损伤最为严重。4.钼镉共同作用导致卵巢Bak-1和Caspase-3基因mRNA表达量显着上升（P<0.05）,CP和Bcl-2 mRNA的表达量显着下降（P<0.05）;5.钼镉联合显着上调卵巢中NF-κB、TNF-α、COX-2基因mRNA表达量（P<0.05）;结论:钼镉联合作用可致鸭卵巢脂质过氧化水平上升,造成卵巢氧化损伤;同时导致多数卵泡发育不良,卵巢间质充血、出血明显,大量结缔组织呈纤维素样坏死。钼镉联合作用导致CP和Bcl-2基因mRNA的表达量下降,Bak-1和Caspase-3的mRNA表达量增加。钼镉联合作用可诱导卵巢中炎症细胞因子NF-κB、COX-2和TNF-α基因mRNA表达量明显增加,诱发卵巢发生炎性应答反应,造成卵巢的炎性损伤。
刘小红[5]（2016）在《水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究》文中研究说明镉是世界上最毒的重金属之一。由于工、农业的发展等因素,自然环境,包括水生态受到严重的镉污染。镉在生物细胞内不被降解,半衰期长,能在各组织累积,并造成极大的损伤。本研究以中国目前常用的环境毒理学研究实验动物稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）性成熟雌鱼为对象,运用组织学、组织化学、透射电镜技术、生理学、分子生物学、转录组学等研究手段和方法,研究水体急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫肝脏的形态结构、肝细胞的细胞器、脂滴数量和沉积、有关代谢的生理生化指标、脂滴形成相关基因的表达、有关脂代谢激素及信号通路影响;结合转录组学,分析潜在的机制。其中第一部分实验内容研究了水体2.0 mg/L镉暴露0-96h,2.5、2.8 mg/L镉暴露96 h以及0、5、25、50、75、100μg/L镉暴露5w和12w对实验鱼肝脏的形态结构、细胞器的影响,以及肝组织脂滴沉积情况,以探讨水体镉暴露对稀有鮈鲫的生长和肝脏组织的损伤情况。第二部分实验克隆了稀有鮈鲫自噬相关基因Beclin1的全长cDNA序列,进行了生物信息学分析,检测了该基因的时空表达模式,并研究了该基因在水体急、慢性镉暴露后的各组织中的表达情况,以初步判断镉暴露与自噬的关系。第三部分实验检测了急、慢性镉暴露后稀有鮈鲫血清生理生化指标以及有关脂滴形成、脂质转运和氧化相关基因的表达,以解释脂滴增多原因。第四部分实验检测了急、慢性水体镉暴露对应激和代谢都有重要调节作用的H-P-I轴的激素含量以及信号通路相关的基因的表达水平,探讨了稀有鮈鲫响应于镉暴露的应激反应。第五部分实验通过转录组分析,研究了水体75μg/L镉暴露5w后稀有鮈鲫差异表达的基因,并检测脂代谢相关基因在其它的急、慢性镉暴露样本的表达情况,结合血清GH家族激素以及血清炎症因子的含量和表达,从而分析镉导致的稀有鮈鲫生长干扰、脂代谢紊乱的潜在机制。主要研究结果:1)0-100μg/L镉暴露5w后稀有鮈鲫的死亡率分别为2.56%,0%,27.91%,37.5%,57.5%,68.18%;75μg/L及以上浓度组稀有鮈鲫肥满度系数显着（P<0.05）降低;25μg/L镉暴露12周后实验鱼体重、空壳重、内脏团重显着（P<0.05）降低。2)水体2.0-2.8 mg/L急性镉暴露都会造成肝脏组织严重的损伤,形态上主要表现为细胞肿胀或皱缩、空泡化;5μg/L慢性镉暴露对稀有鮈鲫肝脏形态上无明显影响,25μg/L及以上浓度组实验鱼肝组织内出现不同大小的空泡结构,100μg/L浓度组细胞受损最严重。50和75μg/l浓度组肝脏严重变形,有多个肿瘤。5-100μg/l慢性镉暴露导致稀有鮈鲫肝细胞内不同程度脂滴沉积,无剂量依赖效应。3)急性镉暴露不同时间,表现出不同病理特征。总体上看,稀有鮈鲫肝细胞表现出糖原减少、细胞器坏死、髓样小体增多、粗面内质网（rer）异常增生或减少、线粒体肿胀、桥粒连接打开、枯否氏细胞增多、细胞坏死、细胞膜损伤、红细胞浸润等现象。急性镉暴露72h-96h,肝细胞内脂滴增多,并首次观察到镉诱导的细胞核脂滴。慢性镉暴露后亚显微水平的变化与急性镉暴露相似:肝细胞肿胀,糖原消失、自噬小体增多,低浓度组rer增生,高浓度组滑面内质网（ser）增生,细胞膜消失或细胞间隙增大,细胞内有脂滴沉积。首次观察到镉诱导的rer同心圆小体和指纹状板层小体。4)稀有鮈鲫的beclin1基因全长cdna序列1940bp,与其它鱼类及高等脊椎动物有高度相似性;该基因编码的由447个氨基酸残基组成的蛋白,含bh3、ccd、ecd结构域,但ccd短于人和啮齿类的长度。水体急性镉暴露后,beclin1基因在鳃、肠显着（p<0.05）升高,脑组织降低;水体慢性镉暴露后,在脑组织显着（p<0.05）上升,但在肝脏显着（p<0.05）降低;beclin1在幼鱼响应于5-100μg/l水体镉暴露的表达变化具有时间和剂量依赖性效应。5)水体2.0mg/l镉暴露后,稀有鮈鲫血清中hdl-c、t-cho、tg、atp含量升高;肝脏hdl-c、t-cho、tg、ldh和乳酸含量升高,cs酶活性降低;慢性镉暴露后,hdl-c、t-cho、tg血清含量呈降低趋势,肝脏内tg显着降低,但100μg/l组实验鱼肝脏t-cho升高。6)与组织学所观察到的肝细胞内的脂滴沉积现象相呼应:负责脂质回肝的hdl-c的主要蛋白成员apoai基因,脂滴形成相关基因plin2、cav2、cpti、cptii,脂质代谢相关基因pparr在急性2.0mg/l镉暴露96h稀有鮈鲫肝脏显着（p<0.05）升高;负责脂质出肝的ldl-c主要蛋白成员apob-100基因却显着（p<0.05）降低。慢性镉暴露5w后,血清中各种脂质成分含量降低,但100μg/l镉浓度组鱼肝脏t-cho含量升高;相关基因仅有cptii基因在100μg/l浓度组实验鱼显着（p<0.05）升高。7)急性镉暴露对稀有鮈鲫血清msh、cortisol含量有显着影响。cortisol合成关键基因star、cyp11a1、cyp11b1表达量显着（p<0.05）升高。cortisol代谢关键基因11β-hsd2在多种组织表达量上升,其在肾脏组织的酶活性含量也升高。cortisol受体gr在鳃、肠、肌肉的表达显着（p<0.05）降低,gr调节基因fkbp5在鳃和肠表达显着（p<0.05）上升。h-p-i轴的crh、acth含量无显着变化,相关基因crh、pomc、crhr、mc2r基因在脑或肾脏的表达不受到镉暴露的显着影响。50μg/l以上浓度镉暴露5w,稀有鮈鲫血清crh、acth、msh、cortisol都显着（p<0.05）升高,100μg/l组实验鱼crh、mc2r、star、cyp11a1、cyp11b1表达量显着（p<0.05）升高,gr表达无显着变化,但fkbp5在鳃和肠显着（p<0.05）升高。8)稀有鮈鲫肝脏中表达量最高的60个基因可分为脂质代谢、消化酶、繁殖、铁或钙离子转运、呼吸链和凝血、先天免疫和应激反应、蛋白合成与降解七类。75μg/l镉暴露后,稀有鮈鲫肝脏组织筛选出288个差异表达基因,其中192个下调。运用rt-qpcr验证了部分基因的表达。9)水体75μg/l镉暴露5w后,从肝脏组织筛选出差异表达基因,其中51个与离子结合相关,27个与锌离子有关,8个分别与铁和钙离子有关;33个与脂质消化吸收和代谢相关,包括SCD,PEPC等;与氧化应激相关的18个;与生长相关的基因11个,包括IGF1。10)镉暴露造成编码GH家族激素基因合成和分泌紊乱;血清炎症因子含量发生显着变化。VtgAO1和SCD基因在慢性镉暴露所有浓度组和急性镉暴露的所有时间点都显着（P<0.05）降低。主要研究结论:1)水体慢性镉暴露导致稀有鮈鲫生长停滞、肥满度系数降低,提示镉暴露后实验鱼能量存储减少,代谢发生紊乱。2)镉对稀有鮈鲫的毒性复杂,具有剂量和暴露时间的特异性;急、慢性镉暴露都可造成肝脏组织严重损伤,凋亡、自噬等调节细胞程序性死亡的生命过程紊乱;内质网的动态变化过程提示其在镉应激反应中具有重要功能。肝细胞功能减退,糖、脂代谢紊乱,伴随有炎症发生。一定浓度慢性镉暴露对稀有鮈鲫具有促进肝细胞增生和异变结构产生的作用。3)稀有鮈鲫Beclin1基因与其它脊椎动物相应基因具有高度同源性,该基因在稀有鮈鲫胚胎、胚后的整个生长发育阶段具有重要的作用,可能参与了水体镉暴露导致肝细胞自噬发生。另外,Beclin1可以作为以稀有鮈鲫幼鱼为对象的水环境镉暴露污染辅助生物指标。4)急性镉暴露后稀有鮈鲫脂代谢的紊乱与脂质的转运紊乱有关,并通过PLIN2、CAV2、PPARr、CPTII介导的代谢通路而调节脂滴形成。慢性镉暴露后稀有鮈鲫各器官的脂肪会被氧化分解,导致肥满度系数、内脏团重等显着降低,但肝脏组织T-CHO的含量升高,说明T-CHO的转运紊乱可能与慢性镉暴露脂滴沉积和脂代谢紊乱有关。5)急性镉暴露主要影响稀有鮈鲫H-P-I轴Cortisol的分泌和合成及其下游的GR的表达;并假设镉介导的Cortisol合成不是通过CRH-ACTH信号通路,而以MSH或其它激素介导的信号实现;然而通过FKBP5介导的GR下调和11β-HSD2的表达升高可以作为负反馈调节有利于缓解Cortisol紊乱带来的毒性。慢性镉暴露会影响H-P-I轴的所有激素的分泌,高浓度也会导致其基因表达和激素合成紊乱,并通过ACTH-MC2R的信号通路控制Cortisol的合成;FKBP5可能通过降低GR的活性而非表达而抑制Cortisol效应。6)稀有鮈鲫的肝脏转录组数据显示了肝脏具有调节消化吸收、免疫、生殖、蛋白合成等功能。镉暴露后,肝脏组织的离子平衡、氧化应激水平、脂肪的消化吸收等过程和功能可能受到干扰;慢性镉暴露对稀有鮈鲫生长的抑制可能与GH-IGF信号通路的抑制有关,而SCD-PEPC等的表达可能参与慢性镉暴露诱导的脂代谢紊乱。7)VtgAO1、SCD等基因可作为检测水体镉暴露的分子指标。
任洪涛,林霖[6]（2016）在《Mo6+对草鱼幼鱼的急性毒性及部分组织结构的影响》文中进行了进一步梳理为了解Mo6+的毒性积累和毒性机制,以及草鱼（Ctenopharyngodon idellus）的健康饲养提供参考,采用静水测试法研究了养殖水体中不同质量浓度Mo6+（0 mg/L,15.33 mg/L,30.67 mg/L,61.33mg/L,122.66mg/L,245.32mg/L）对草鱼幼鱼鳃、肝胰脏及心脏组织结构的影响。结果表明:Mo6+对草鱼24h、48h和96h的半数致死浓度（LC50）分别为1.553 6mg/L、1.000 7mg/L和0.000 1mg/L,由公式（48hLC50×0.3）/（24hLC50/48hLC50）2和96hLC50×0.1计算的安全质量浓度分别为0.543mg/L和0.001mg/L。中毒后草鱼鳃的鳃小片卷曲、变短,呼吸上皮细胞水肿变性并部分脱落,细胞开始出现破裂,细胞液溢出,细胞核出现轻微的聚集状况;肝脏的肝细胞出现严重水样变性,并且血窦扩张,伴随细胞溶解、浑浊变性和轮廓模糊,形成局部的点状病灶;心脏的肌纤维细胞体积增大,单位视野内细胞数变少,细胞核形态异常,以及局部的细胞空泡变性,但出现少量细胞核偏移和密集并且细胞轮廓模糊,肌纤维有轻微断裂现象。
孙硕,宿晓琳,王桂燕[7]（2015）在《氯化镉对草鱼的毒性研究》文中研究表明以静水生物测试法研究氯化镉对草鱼的急性毒性,并求出暴露时间分别为24、48、72和96h的半数致死质量浓度（LC50）。根据鱼类毒性分级标准,判断重金属镉对草鱼的生态毒性,并利用安全系数0.01来估算其安全浓度。结果表明:镉对草鱼的急性毒性作用时间为24、48、72和96h的LC50分别是44.10、33.48、28.00和23.51mg/L,因此镉对草鱼的毒性为高毒,其安全浓度为0.235 mg/L。
唐龙[8]（2014）在《饲料添加光合细菌对卵形鲳鲹生长性能、肝脏、血清指标的影响及其各部位蛋白质营养价值评价》文中指出本研究以我国南方养殖的卵形鲳鲹（Trachinotus ovatus）为研究对象,通过对卵形鲳鲹饲料中添加不同梯度光合细菌复合制剂对其生长性能及肝脏、血清指标的影响,以及对卵形鲳鲹各部位（背部肌肉、腹部肌肉、鱼头、鱼皮及内脏）的基本营养成分进行测定。结果如下：1、卵形鲳鲹饲料中设计不同梯度光合细菌复合制剂,光合细菌添加水平分别为0.0%、1.0%、2.0%、3.0%,观察光合细菌对卵形鲳鲹生长性能及肝脏、血清指标的影响。结果表明,卵形鲳鲹的末均重FBW、增重率WGR及特定生长率SGR随饲料中光合细菌水平的增加呈现先上升后下降的趋势,2.0%组的FBW、WGR和SGR显着高于对照组与3.0%组（P<0.05）,卵形鲳鲹肝体比HSI在组间无显着性差异（P>0.05）；随着光合细菌添加水平的增加,卵形鲳鲹肝脏脂肪含量及血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性呈先下降后上升的趋势,当光合细菌复合制剂添加水平为2.0%时,卵形鲳鲹肝脏脂肪含量及血清中谷草转氨酶及谷丙转氨酶活性显着低于其余各组（P<0.05）。饲料中适量添加光合细菌复合制剂能够促进卵形鲳鲹的生长,降低鱼体脂肪肝的发病率,当光合细菌添加水平为2.0%时,效果最显着。2、对海水网箱养殖的卵形鲳鲹各部位（背部肌肉、腹部肌肉、鱼头、鱼皮及内脏）的基本营养成分进行测定,评价其各部位蛋白质的营养价值。结果表明,卵形鲳鲹可食部位蛋白质含量丰富,在18%～21%之间；脂肪含量适中,在7%-19%之间；氨基酸含量在18%-23%之间,其中必需氨基酸含量占氨基酸总量的比值均在43%以上,风味氨基酸含量占氨基酸总量的比值均在44%以上,氨基酸的支／芳值在2.30-2.40之间。综合评价卵形鲳鲹的背部肌肉、腹部肌肉和头部肌肉蛋白质的营养价值较高,而鱼皮和内脏的蛋白质营养价值较低；同时各可食部位氨基酸的支／芳值接近于人体标准水平,有助于保护人体肝脏。因此,卵形鲳鲹肌肉蛋白质是一种高级营养健康食品。
温茹淑,郑清梅,徐鸿飞,方展强[9]（2012）在《Hg2+对草鱼鱼种肾、鳃Na+/K+-ATPase及其组织结构的影响》文中研究表明以浸浴法对草鱼鱼种进行毒性试验,比较在0.045,0.091,0.181 mg/L 3个不同Hg2+质量浓度下,草鱼的肾脏和鳃组织中Na+/K+-ATPase活性变化规律及其组织结构的变化。结果表明:相对鳃而言,Hg2+对草鱼肾的Na+/K+-ATPase活性有较明显的抑制作用,且随着暴露时间的延长而加强。在组织结构上,草鱼肾小管出现萎缩的现象,肾小球未见明显症状;鳃小片出现弯曲、融合、脱落和顶端呈肿大等现象,肾、鳃的组织结构特征均具有时间及剂量效应。
张永静[10]（2012）在《饲料中铅含量对建鲤的毒性效应及3种非金属矿吸附剂对其毒性缓解作用研究》文中认为饲料中铅污染已经成为制约水产养殖健康发展的重要障碍。本试验以建鲤（Cyprinus carpio var.Jian）为试验对象,探讨了不同水平的铅对建鲤的毒性效应,以期为阐明饲料中铅对水产动物的毒害作用,防止铅中毒提供科学依据；试验研究了蒙脱石、沸石和凹凸棒土三种非金属矿物质对铅毒性缓解作用,为其以后在水产饲料中的应用作初步探究。1饲料中铅含量对建鲤生产性能及组织酶活性影响本研究探讨饲料中不同水平铅对建鲤生产性能、血清和肝胰脏酶活性的影响。试验选取483尾建鲤（初始平均体质量为22.95±0.15g）,随机分为7组,各组Pb2+理论添加量分别为0（对照组）、2、5、10、20、50和100mg/kg,每组3个重复,为期60d。试验结束后,测定建鲤生产性能、血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）和乳酸脱氢酶（LDH）的活性和肝胰脏中丙二醛（MDA）的含量,超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性。结果表明,与对照组相比,铅暴露组建鲤的增重率和饵料系数无显着差异（P>0.05）,但各铅暴露组的增重率呈下降趋势,饵料系数呈上升趋势；随着饲料中铅水平的增加,各铅暴露组血清AST活性呈上升趋势,其中与对照组相比,100mgPb/kg暴露组建鲤血清中AST活性显着升高（P<0.05）；各铅暴露组血清ALT和LDH活性呈上升趋势,其中与对照组相比,20,50和100mgPb/kg暴露组建鲤血清中ALT和LDH活性显着升高（P<0.05）。肝胰脏中GSH-PX活性被铅诱导升高,100mgPb/kg暴露组与对照组相比,显着升高（P<0.05）；MDA的含量呈上升趋势,SOD的活性被铅诱导升高。综上所述,铅暴露会引起建鲤组织生化指标的改变,对鱼体有多种毒性效应,并且毒性效应指标的变化与铅污染水平有剂量效应关系,使得鱼体受损,并且可以协同使用这些指标指示铅污染情况的发生。2饲料中铅含量在建鲤组织残留量及对微量元素（Cu、Fe、Zn）含量的影响试验设计同试验一。试验结束后,测定建鲤肌肉、肝脏、肾脏、鳃和肠道中等组织中铅的残留量及肝脏和肾脏组织中微量元素铜（Cu）、铁（Fe）、锌（Zn）的含量。结果显示,随着饲料中铅水平的增加,建鲤各组织中铅的残留量增加,不同组织增加幅度不同,表现出了组织亲和性,铅在建鲤体内积累的基本模式为中肾>肠道>肝脏>鳃>肌肉；随着建鲤暴露时间的延长,各组织中铅的残留量增加,表现出了时间累积性。随着饲料中铅水平的增加,建鲤肝脏和肾脏中Cu、Fe、Zn的含量呈下降趋势,不同的被测组织中下降的幅度不同。结果表明,肾脏和肝脏作为建鲤铅残留量高的内脏组织可以敏感的反映饲料中铅的污染。随着饲料中铅水平的增加,降低了建鲤肝脏和肾脏中微量元素的含量。33种非金属矿吸附剂对铅毒性缓解作用研究试验选取345尾建鲤（初始平均体质量为22.95±0.15g）,随机分为5组,其中对照组饲喂基础日粮,试验组1Pb2+理论添加量为100mg/kg,试验组2、3和4分别在试验组1的基础上添加0.5%的蒙脱石、3%的沸石和3%的凹凸棒土,研究三种非金属矿物质对铅毒性缓解作用,为其在饲料中的应用进行初探。体外吸附试验探讨了吸附时间、PH和铅离子的起始浓度对吸附效果的影响。养殖试验则比较了三种非金属矿物质对建鲤生长性能和组织铅残留的影响。体外试验表明,三种非金属矿物质的吸附率随着吸附时间的延长呈现上升趋势,其中蒙脱石和凹凸棒土在120min基本达到饱和吸附。随着溶液PH的增加吸附率增加。随着铅离子起始浓度的增加,吸附率呈现先增加后降低的趋势；养殖实验表明,添加蒙脱石、沸石和凹凸棒土后增重率分别提高了12.02%、1.95%和1.80%,饵料系数也分别降低了7.73%、6.70%和4.12%,对成活率无影响。添加蒙脱石后降低了铅在肌肉、肝脏、肾脏、鳃和肠道中的残留。添加沸石后降低了铅在肝脏、肾脏和肠道中的残留,没有降低肌肉中铅含量,增加了鳃中的铅含量。添加凹凸棒土后降低了铅在肝脏、肾脏和肠道中的残留,增加了肌肉中铅含量,对鳃中的铅含量无影响。总体来看,蒙脱石的效果要优于沸石和凹凸棒土。
二、草鱼实验性镉中毒的肝、肾病理学研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、草鱼实验性镉中毒的肝、肾病理学研究（论文提纲范文）
（1）镉在乌龟的毒代动力学及其对肝肾损伤的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 综述 |
| 1.我国水体镉污染概况 |
| 2.我国水产品镉污染概况 |
| 3.镉对水生生物的影响 |
| 4.乌龟的药用与营养价值 |
| 4.1 乌龟的药用价值 |
| 4.2 乌龟的营养价值 |
| 5.本学位论文的研究意义 |
| 本学位论文整体设计方案 |
| 第二章 镉在乌龟的毒代动力学研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 镉的吸收 |
| 2.2 镉的分布 |
| 2.3 镉的排泄 |
| 2.4 镉对乌龟血浆脂质过氧化动态影响 |
| 2.5 镉对乌龟血浆中ALT、AST活性及TP含量的动态影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 镉在乌龟毒代动力学研究 |
| 3.2 镉对乌龟血浆脂质过氧化动态影响 |
| 3.3 镉对乌龟血浆ALT、AST活性和TP含量的动态影响 |
| 4.小结 |
| 第三章 镉对乌龟肝组织结构、超微结构、氧化损伤及基因表达的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 镉对肝脏损伤的大体观察 |
| 2.2 镉诱导的肝组织学损伤 |
| 2.3 镉诱导的肝超微结构损伤 |
| 2.4 镉对肝指数的影响 |
| 2.5 镉对肝组织SOD、CAT活性及GSH、MDA含量的影响 |
| 2.6 镉对肝组织TP含量及ALT、AST活性的影响 |
| 2.7 镉对乌龟肝组织基因mRNA表达的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 镉对肝组织显微亚显微结构的影响 |
| 3.2 镉对肝指数的影响 |
| 3.3 镉对肝组织氧化损伤和肝功能的影响 |
| 3.4 镉对肝基因表达的影响 |
| 4.小结 |
| 第四章 镉对乌龟肾组织结构、超微结构、氧化损伤及功能的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 镉对肾脏损伤的大体观察 |
| 2.2 镉诱导的肾组织学损伤 |
| 2.3 镉对肾脏超微结构的影响 |
| 2.4 镉对乌龟肾组织SOD、CAT活力和GSH、MDA含量的影响 |
| 2.5 镉对肾组织TP、血浆中CRE和BUN含量的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 镉对肾组织显微亚显微结构的损伤 |
| 3.2 镉对肾组织脂质过氧化的损伤 |
| 3.3 镉对肾功能的影响 |
| 4.小结 |
| 全文结论及创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简介及联系方式 |
（2）镉胁迫与净化对草鱼镉蓄积和MATE基因表达影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 重金属镉概述 |
| 1.1.1 重金属镉的污染现状 |
| 1.1.2 镉的代谢及毒性 |
| 1.1.3 镉对鱼类的危害 |
| 1.2 镉转运机制研究 |
| 1.2.1 钙离子通道 |
| 1.2.2二价金属转运体1 |
| 1.2.3 锌铁调控蛋白 |
| 1.2.4 其他转运蛋白 |
| 1.3 MATE概述 |
| 1.3.1 MATE蛋白分类 |
| 1.3.2 MATE蛋白结构与功能 |
| 1.3.3 MATE与金属转运的相关研究 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 1.5 研究内容 |
| 第二章 镉胁迫及后期净化对草鱼镉蓄积浓度的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验试剂及仪器 |
| 2.1.3 半数致死浓度的计算 |
| 2.1.4 半致死浓度测定预备试验 |
| 2.1.5 半致死浓度测定正式试验 |
| 2.1.6 草鱼胁迫试验 |
| 2.1.7 鱼体组织样的选取和采集 |
| 2.1.8 鱼体组织样的镉浓度测定 |
| 2.1.9 数据分析与统计 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 镉对草鱼的半致死浓度 |
| 2.2.2 镉胁迫期间Cd在鱼体主要组织的积累和分布状况 |
| 2.2.3 镉胁迫期间草鱼不同组织间的相关关系 |
| 2.2.4 净化期间Cd在鱼体主要组织的分布状况 |
| 2.2.5 净化期间草鱼不同组织间的相关关系 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 镉对草鱼96h LC_(50) |
| 2.3.2 重金属镉在鱼鳃中浓度变化规律 |
| 2.3.3 重金属镉在肝胰脏和肾脏中的浓度变化规律 |
| 2.3.4 重金属镉在肌肉中的浓度变化规律 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 镉胁迫及后期净化对MATE基因的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验动物 |
| 3.1.2 草鱼胁迫试验 |
| 3.1.3 试验试剂及仪器 |
| 3.1.4 鱼体组织样的选取和采集 |
| 3.2 MATE3、MATE5、MATE6 mRNA表达变化检测 |
| 3.2.1 管家基因的选择与实时荧光定量PCR引物设计 |
| 3.2.2 样品总RNA提取、检测及c DNA合成 |
| 3.2.3 PCR扩增 |
| 3.2.4 片段的克隆和测序 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR |
| 3.2.6 数据处理 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 总RNA提取与检测 |
| 3.3.2 MATE3、MATE5和MATE6 cDNA PCR扩增结果 |
| 3.3.3 实时定量引物的特异性 |
| 3.3.4 MATE3、MATE5、MATE6在正常草鱼的表达情况 |
| 3.3.5 MATE3、MATE5、MATE6在镉胁迫及后期净化下的表达情况 |
| 3.3.6 草鱼鳃丝镉蓄积量与MATE3、MATE5、MATE6的表达关系 |
| 3.3.7 草鱼肝胰脏镉蓄积量与MATE3、MATE5、MATE6的表达关系 |
| 3.3.8 草鱼肾脏镉蓄积量与MATE3、MATE5、MATE6的表达关系 |
| 3.3.9 草鱼肌肉镉蓄积量与MATE3、MATE5、MATE6的表达关系 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 正常草鱼MATE基因分布及表达 |
| 3.4.2 草鱼鳃丝镉浓度与MATE基因表达分析 |
| 3.4.3 草鱼肝胰脏镉浓度与MATE基因表达分析 |
| 3.4.4 草鱼肾脏镉浓度与MATE基因表达分析 |
| 3.4.5 草鱼肌肉镉浓度与MATE基因表达分析 |
| 3.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文 |
| 致谢 |
（3）乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的毒性研究（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 供试材料及试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的急性毒性试验 |
| 1.2.2 乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的生理毒性试验 |
| 1.2.3乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅血细胞的DNA损伤试验 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的急性毒性 |
| 2.2 乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅血清GPT和GOT活性的影响 |
| 2.3 乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅血细胞DNA损伤结果 |
| 3 结论与讨论 |
（4）钼镉联合诱导对麻鸭卵巢抗氧化功能及相关基因表达量的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 钼 |
| 1.1 钼元素介绍 |
| 1.2 钼的动力学 |
| 1.2.1 钼的分布 |
| 1.2.2 钼的吸收和代谢 |
| 1.3 钼的生物学作用 |
| 1.4 钼缺乏 |
| 1.5 钼的毒性作用 |
| 1.5.2 钼中毒对机体抗氧化系统的影响 |
| 1.5.3 钼中毒对生殖系统的影响 |
| 1.5.4 钼中毒对组织的病理损伤 |
| 2 镉 |
| 2.1 镉的毒性作用 |
| 2.2 镉中毒对生殖系统的影响 |
| 2.3 镉中毒对机体抗氧化机能的影响 |
| 2.4 镉中毒对组织的病理损伤 |
| 3 钼、镉对铜蓝蛋白的影响 |
| 4 钼、镉对细胞凋亡基因的影响 |
| 5 钼、镉对炎症细胞因子的影响 |
| 6 本研究的目的和意义 |
| 第二章 试验研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物的饲养管理 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 辅助器材 |
| 1.4 主要试剂 |
| 1.5 试验设计 |
| 1.6 样品采集 |
| 1.7 卵巢组织匀浆的制作 |
| 1.8 卵巢组织中总RNA的提取与荧光定量扩增反应 |
| 1.8.1 卵巢总RNA的提取及基因引物探针的设计 |
| 1.8.2 RNA纯度及完整性检测 |
| 1.8.3 去基因组DNA和反转录 |
| 1.8.4 Taq Man RT-PCR反应 |
| 1.8.5 SYBR Green RT-PCR反应 |
| 1.9 数据分析 |
| 1.9.1 相对定量计算方法 |
| 1.9.2 数据差异性分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 钼镉联合诱导对卵巢抗氧化能力的影响 |
| 2.1.1 钼镉联合诱导对卵巢NOS活性的影响 |
| 2.1.2 钼镉联合诱导对卵巢T-AOC的影响 |
| 2.1.3 钼镉联合诱导对卵巢XOD活性的影响 |
| 2.1.4 钼镉联合诱导对卵巢SOD活性的影响 |
| 2.1.5 钼镉联合诱导对卵巢CAT活性的影响 |
| 2.1.6 钼镉联合诱导对卵巢MDA含量的影响 |
| 2.2 钼镉联合诱导对卵巢相关基因mRNA表达量的影响 |
| 2.2.1 凋亡基因Bcl-2 mRNA相对表达量的结果 |
| 2.2.2 凋亡基因Bak-1 mRNA表达量的结果 |
| 2.2.3 凋亡基因Caspase-3 mRNA表达量的结果 |
| 2.2.4 卵巢CP基因mRNA表达量的结果 |
| 2.2.5 卵巢NF-κB基因mRNA表达量的结果 |
| 2.2.6 卵巢TNF-α 基因mRNA表达量的结果 |
| 2.2.7 卵巢COX-2 基因mRNA表达量的结果 |
| 2.3 钼镉联合诱导对卵巢组织病理学的影响 |
| 2.4 卵巢超微结构的观察结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 钼镉联合诱导对卵巢抗氧化能力的影响 |
| 3.2 钼镉联合诱导对卵巢组织的病理损伤 |
| 3.3 钼镉联合诱导对卵巢超微结构的损伤作用 |
| 3.4 钼镉联合诱导对卵巢凋亡调控基因mRNA表达量的影响 |
| 3.5 钼镉联合诱导对卵巢CP mRNA表达量的影响 |
| 3.6 钼镉联合诱导对卵巢炎症细胞因子基因mRNA表达量的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附录：硕士期间发表的论文 |
| 致谢 |
（5）水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 水体镉污染对鱼类毒性研究进展 |
| 1.1.1 镉在鱼组织中生物累积情况及半致死毒性效应 |
| 1.1.2 镉的环境内分泌干扰属性 |
| 1.1.3 镉对鱼类肝、肾、鳃等器官的损害 |
| 1.1.4 镉对鱼类血液和生理生化指标的影响 |
| 1.1.5 镉暴露对鱼类代谢的影响 |
| 1.1.6 镉对鱼类的生物毒性机制 |
| 1.1.7 镉生物毒性的保护剂 |
| 1.2 脂质代谢研究进展 |
| 1.2.1 脂滴的形成、生长和降解 |
| 1.2.2 脂滴的功能 |
| 1.2.3 相关因子对脂滴形成的影响 |
| 1.2.4 脂滴紊乱与相关疾病 |
| 1.2.5 细胞核脂滴 |
| 1.3 研究目标及意义 |
| 第2章 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏结构的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验鱼的来源与驯养 |
| 2.1.2 水体镉暴露 |
| 2.1.3 组织结构材料处理 |
| 2.1.4 超微结构材料处理 |
| 2.1.5 生长指标测量及油红O染色 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 慢性镉处理后雌性稀有鮈鲫的生长 |
| 2.2.2 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.3 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.4 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.5 水体 5-50 μg/L镉暴露 12w雌性稀有鮈鲫肝脏组织学结构 |
| 2.2.6 未经镉暴露雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.7 水体急性镉暴露后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.8 水体 5-100 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.9 水体 5-75 μg/L镉暴露 12w后雌性稀有鮈鲫肝脏超微结构 |
| 2.2.10 水体 0-100 μg/L镉暴露 5w或 12w雌性稀有鮈鲫肝脏脂滴沉积 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 水体镉暴露对鱼类生长影响 |
| 2.3.2 稀有鮈鲫肝脏的显微与超微结构特点 |
| 2.3.3 镉暴露对稀有鮈鲫肝脏形态结构以及肝细胞的毒理影响 |
| 小结 |
| 第3章 稀有鮈鲫Beclin1基因分子克隆及水体镉暴露对其表达的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验鱼的来源与驯养 |
| 3.1.2 水体镉暴露及取材 |
| 3.1.3 总RNA提取和cDNA合成 |
| 3.1.4 稀有鮈鲫Beclin1基因（rmBeclin1）的分子克隆 |
| 3.1.5 稀有鮈鲫Beclin1基因序列分析 |
| 3.1.6 稀有鮈鲫Beclin1基因的时空表达模式 |
| 3.1.7 实时荧光定量PCR（RT-qPCR） |
| 3.1.8 数据分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 稀有鮈鲫rmBeclin1基因cDNA序列和氨基酸序列 |
| 3.2.2 序列和进化树分析 |
| 3.2.3 rmBeclin1基因的时空表达 |
| 3.2.4 水体镉暴露后rmBeclin1基因的表达 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 rmBeclin1基因的序列结构特点 |
| 3.3.2 rmBeclin1基因的时空表达特点 |
| 3.3.3 水体镉暴露对稀有鮈鲫rmBeclin1基因表达的影响 |
| 小结 |
| 第4章 水体镉暴露对稀有鮈鲫代谢相关生理指标及脂滴形成相关基因表达的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验鱼饲养 |
| 4.1.2 水体镉暴露 |
| 4.1.3 静止代谢率 |
| 4.1.4 组织蛋白提取 |
| 4.1.5 血清分离 |
| 4.1.6 生理指标检测 |
| 4.1.7 总RNA提取与逆转录 |
| 4.1.8 实时荧光定量PCR（RT-qPCR） |
| 4.1.9 SDS-PAGE电泳和Western blot |
| 4.1.10 数据分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 急性镉暴露对血清和肝脏代谢指标的影响 |
| 4.2.2 水体镉暴露 5w对血清和肝脏代谢指标的影响 |
| 4.2.3 水体急性镉暴露后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况 |
| 4.2.4 水体镉暴露 5w后稀有鮈鲫脂滴形成与脂代谢相关基因的转录情况 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏代谢功能的影响 |
| 4.3.2 水体镉暴露对鱼类脂肪代谢及脂滴形成的影响 |
| 小结 |
| 第5章 水体镉暴露对稀有鮈鲫H-P-I轴及下游信号的影响 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验鱼饲养和水体镉暴露处理、取材 |
| 5.1.2 组织总RNA提取及逆转录 |
| 5.1.3 RT-qPCR检测镉暴露后相关基因的表达 |
| 5.1.4 酶联免疫吸附（ELISA） |
| 5.1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot |
| 5.1.6 数据处理和统计分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 水体急性镉暴露 |
| 5.2.2 水体慢性镉暴露 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 水体急性镉暴露对雌性稀有鮈鲫H-P-I轴激素及信号通路的影响 |
| 5.3.2 水体慢性镉暴露后对稀有鮈鲫H-P-I轴激素及其信号通路的影响 |
| 小结 |
| 第6章 水体镉暴露诱导的稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢紊乱潜在分子机制研究 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验鱼饲养、水体镉暴露以及取材 |
| 6.1.2 实验鱼肝脏总RNA提取、建库以及RNA测序 |
| 6.1.3 转录组数据分析、组装和注释 |
| 6.1.4 基因表达的定量以及差异表达基因分析 |
| 6.1.5 实时荧光定量PCR（RT-qPCR） |
| 6.1.6 ELISA检测 |
| 6.1.7 数据处理和统计分析 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 转录组测序、组装和注释 |
| 6.2.2 水体 75 μg/L镉暴露 5w后雌性稀有鮈鲫肝脏差异表达基因 |
| 6.2.3 实时荧光定量PCR验证差异表达基因 |
| 6.2.4 差异表达基因在急性以及其它浓度慢性镉暴露处理组的表达 |
| 6.2.5 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫生长激素家族激素的影响 |
| 6.2.6 急、慢性镉暴露对稀有鮈鲫机体炎症水平的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 稀有鮈鲫肝脏转录组 |
| 6.3.2 水体镉暴露对稀有鮈鲫生长的干扰 |
| 6.3.3 水体镉暴露与肝细胞离子平衡及氧化应激 |
| 6.3.4 水体镉暴露与炎症 |
| 6.3.5 水体镉暴露与脂代谢紊乱 |
| 6.3.6 肝脏组织筛选出的用于镉污染检测的生物标记 |
| 小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 发表文章目录 |
（6）Mo6+对草鱼幼鱼的急性毒性及部分组织结构的影响（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1材料 |
| 1.2预试验 |
| 1.3急性毒性试验 |
| 1.4样品采集 |
| 1.5统计分析 |
| 2结果与分析 |
| 2.1中毒症状 |
| 2.2急性毒性 |
| 2.3组织结构变化 |
| 2.3.1腮组织 |
| 2.3.2肝胰脏组织 |
| 2.3.3心脏组织 |
| 3结论与讨论 |
| 3.1Mo6+对草鱼的急性毒性 |
| 3.2Mo6+对草鱼组织器官的损伤 |
（7）氯化镉对草鱼的毒性研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 预试验 |
| 1.2.2 正式试验 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 Cd2+对草鱼的毒性效应 |
| 2.2 镉对草鱼的安全浓度 |
| 3 结论 |
（8）饲料添加光合细菌对卵形鲳鲹生长性能、肝脏、血清指标的影响及其各部位蛋白质营养价值评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 光合细菌在水产养殖业的研究进展 |
| 1.1.1 光合细菌营养成分研究 |
| 1.1.1.1 一般营养成分含量 |
| 1.1.1.2 氨基酸含量 |
| 1.1.1.3 细胞色素及生理活性物质 |
| 1.1.2 光合细菌在水产养殖中的研究与应用 |
| 1.1.2.1 净化水质,维持养殖水体稳定 |
| 1.1.2.2 促进鱼类生长 |
| 1.1.2.3 提高鱼体免疫力,防治鱼病 |
| 1.1.2.4 苗种培育和饵料生物 |
| 1.1.2.5 其他方面的作用 |
| 1.2 卵形鲳鲹的研究概况 |
| 1.3 本研究目的与意义 |
| 第二章 饲料添加光合细菌复合制剂对卵形鲳鲹生长性能、肝脏及血清指标的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.2.1 卵形鲳鲹生长相关性能、血清指标及肝脏脂肪含量的测定 |
| 2.1.2.2 数据计算公式与统计分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 光合细菌复合制剂对卵形鲳鲹生长性能的影响 |
| 2.2.2 光合细菌复合制剂对卵形鲳鲹血清指标及肝脏脂肪含量的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 光合细菌复合制剂对卵形鲳鲹生长性能的影响 |
| 2.3.2 光合细菌复合制剂对卵形鲳鲹肝脏及血清指标的影响 |
| 小结 |
| 第三章 卵形鲳鲹各部位蛋白质营养价值评价 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 |
| 3.1.3 试验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 卵形鲳鲹一般营养成分 |
| 3.2.2 卵形鲳鲹各部位氨基酸组成与含量 |
| 3.2.3 卵形鲳鲹各部位必需氨基酸组成的评价 |
| 3.2.4 卵形鲳鲹各部位氨基酸的支／芳值分析 |
| 3.2.5 卵形鲳鲹各部位鲜味氨基酸的组成分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 卵形鲳鲹一般营养成分分析 |
| 3.3.2 卵形鲳鲹各部位氨基酸组成与含量分析 |
| 3.3.3 卵形鲳鲹各部位必需氨基酸组成的评价 |
| 3.3.4 卵形鲳鲹各部位氨基酸的支／芳值分析 |
| 3.3.5 卵形鲳鲹各部位鲜味氨基酸的组成分析 |
| 小结 |
| 第四章 总结 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
（9）Hg2+对草鱼鱼种肾、鳃Na+/K+-ATPase及其组织结构的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试验条件 |
| 1.3 暴露实验 |
| 1.4 Na+/K+-ATPase活性的测定 |
| 1.5 数据处理与分析 |
| 1.6 组织切片制作 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 草鱼状态及解剖观察 |
| 2.2 Hg2+对草鱼鱼种肾、鳃组织Na+/K+-ATPase活性的影响 |
| 2.3 Hg2+处理72 h, 对草鱼鱼种肾、鳃Na+/ K+-ATPase的影响比较 |
| 2.4 Hg2+对草鱼鱼种肾组织结构的影响 |
| 2.5 Hg2+对草鱼鱼种鳃组织结构的影响 |
| 3 讨 论 |
| 3.1 Hg2+对草鱼Na+/K+-ATPase活性影响 |
| 3.2 Hg2+对草鱼的肾脏、鳃组织结构的毒性 |
（10）饲料中铅含量对建鲤的毒性效应及3种非金属矿吸附剂对其毒性缓解作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 常用缩略语 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 铅的理化性质及污染途径 |
| 1.1 铅的理化性质 |
| 1.2 水生动物面临铅污染途径 |
| 2 铅在水生动物中的蓄积与代谢 |
| 2.1 水生动物组织铅吸收特点 |
| 3 铅对水生动物的毒性作用 |
| 3.1 铅对免疫系统的影响 |
| 3.2 铅对造血系统的影响 |
| 3.3 铅对生殖系统的影响 |
| 3.4 铅对内分泌系统的影响 |
| 4 重金属与生物标志物 |
| 4.1 抗氧化应激系统 |
| 4.2 金属硫蛋白 |
| 4.3 腺苷三磷酸酶 |
| 4.4 乙酰胆碱酯酶 |
| 4.5 DNA |
| 4.6 ALT、AST等代谢酶 |
| 5 减少饲料中重金属污染的方法 |
| 5.1 减少饲料原料中重金属的含量 |
| 5.2 饲料中添加营养素防治 |
| 5.3 饲料中添加吸附剂 |
| 6 本研究的目的和意义 |
| 参考文献 |
| 第一章 饲料中铅含量对建鲤生产性能及组织酶活性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验日粮 |
| 1.3 试验管理 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 测定指标与方法 |
| 1.6 数据处理与分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 铅对建鲤生产性能的影响 |
| 2.2 铅对建鲤血清代谢酶的影响 |
| 2.3 铅对建鲤肝胰脏中MDA含量和抗氧化酶活性的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 铅对建鲤生长性能的影响 |
| 3.2 铅对建鲤血清代谢酶活性的影响 |
| 3.3 铅对建鲤肝胰脏中MDA含量和抗氧化酶活性的影响 |
| 参考文献 |
| 第二章 饲料中铅含量在建鲤组织残留量及对微量元素(Cu、Fe、Zn)含量的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验日粮 |
| 1.3 试验管理 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 测定指标与方法 |
| 1.6 数据处理与分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同组织中铅残留量 |
| 2.2 建鲤肝脏和肾脏中Cu、Fe、Zn的含量 |
| 3 讨论 |
| 3.1 铅对建鲤各组织中铅残留量的影响 |
| 3.2 铅对建鲤肝脏和肾脏中Cu、Fe、Zn含量的影响 |
| 参考文献 |
| 第三章 三种非金属矿物质对铅毒性减缓作用研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 体外吸附实验 |
| 1.3 养殖试验 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 测定指标与方法 |
| 1.6 数据处理与分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 体外吸附试验 |
| 2.2 养殖试验 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 硕士学位期间发表的学术论文 |
四、草鱼实验性镉中毒的肝、肾病理学研究（论文参考文献）
- [1]镉在乌龟的毒代动力学及其对肝肾损伤的研究[D]. 霍俊凤. 山西大学, 2018(04)
- [2]镉胁迫与净化对草鱼镉蓄积和MATE基因表达影响的研究[D]. 吴勇亮. 佛山科学技术学院, 2018(03)
- [3]乙氧氟草醚对大鳞副泥鳅的毒性研究[J]. 夏晓华,卢辰华,李墨溢,王坡,董慧,高亚丹,常重杰. 河南农业科学, 2016(07)
- [4]钼镉联合诱导对麻鸭卵巢抗氧化功能及相关基因表达量的影响[D]. 夏冰. 江西农业大学, 2016(03)
- [5]水体镉暴露对稀有鮈鲫肝脏毒性及脂代谢影响的初步研究[D]. 刘小红. 西南大学, 2016(01)
- [6]Mo6+对草鱼幼鱼的急性毒性及部分组织结构的影响[J]. 任洪涛,林霖. 贵州农业科学, 2016(02)
- [7]氯化镉对草鱼的毒性研究[J]. 孙硕,宿晓琳,王桂燕. 沈阳理工大学学报, 2015(01)
- [8]饲料添加光合细菌对卵形鲳鲹生长性能、肝脏、血清指标的影响及其各部位蛋白质营养价值评价[D]. 唐龙. 广西大学, 2014(02)
- [9]Hg2+对草鱼鱼种肾、鳃Na+/K+-ATPase及其组织结构的影响[J]. 温茹淑,郑清梅,徐鸿飞,方展强. 江西农业大学学报, 2012(05)
- [10]饲料中铅含量对建鲤的毒性效应及3种非金属矿吸附剂对其毒性缓解作用研究[D]. 张永静. 南京农业大学, 2012(01)